Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Studies on cryopreServation OF in vitro produced cattle embryos /
المؤلف
Helmy, nermeen atef.
الموضوع
physiology.
تاريخ النشر
2005.
عدد الصفحات
136 .P :
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 147

from 147

Abstract

تهدف الدراسة الحالية الى معرفة تأثير اضافة معاملات مختلفة من الكربوهيدرات و المواد ذات الوزن الجزيئى الكبير( السكروز، التريهالوز ، البولي فينيل بيروليدون + السكروز، البولي فينيل بيروليدون + التريهالوز، البولى ايثيلين جليكول + السكروز و و البولى ايثيلين جليكول + التريهالوز ) الى السائل المستخدم فى تجميد بويضات الأبقار الغير نامية والنامية بالاضافة الى الطور الجنينى التوتى و البلاستيولا على حيوية البويضات والأجنة المنيجة فى المعمل بعد التجميد وكذلك على مقدرة المراحل السابقة على انتاج أجنة فى المعمل. بالاضافة الى تحديد أفضل المعاملات المستخدمة وكذا أفضل المراحل التى يمكن استخدامها للتجميد.
لهذا الغرض تم تجميع عدد 5760 بويضة غير نامية من مبايض الأبقار التى تم الحصول عليها من المجزر. كذلك أخذ عدد من هذة البويضات وأستخدمت فى التجميد كما تم استخدام جزء أخر فى الحصول على بويضات نامية فى المعمل باستخدام بيئة النمو المناسبة لذلك والمضاف اليها الهرمون الحاث لحويصلة جراف، الهرمون المشيمى الأدمى و هرمون الاستروجين. ثم تم استخدام جزء من البويضات النامية فى التجميد واستخدام الجزء الاخر فى انتاج أجنة معمليا ( الطور التوتى والبلاستيولا ) واستخدامهم فى التجميد.
خلال الدراسة، بالإضافة إلى المجموعة الضابطة ( التى لا يحتوى فيها سائل التجميد على أية اضافات )، تم القيام ب 6 تجارب منفصلة لدراسة تأثير إضافة كل من : السكروز، التريهالوز، البولي فينيل بيروليدون + السكروز، البولي فينيل بيروليدون + التريهالوز، البولى ايثيلين جليكول + السكروز و البولى ايثيلين جليكول + التريهالوز الى السائل المستخدم فى تجميد البويضات الغير نامية، النامية و الأجنة المنتجة فى المعمل. وتم تسجيل معدل الخلايا ذات الشكل الطبيعى و الخلايا الحية باستخدام صبغة التريبان الزرقاء للمراحل المختلفة كم تم تسجيل معدل الحصول على الطور التوتى وطور البلاستيولا فى المعاملات المختلفة.
أثبتت الدراسة أن اضافة الكربوهيدرات سواء ان كان السكروز أو التريهالوز و المواد ذات الوزن الجزيئى الكبير الى سائل التجميد يؤدى الى زيادة واضحة فى حيوية الخلايا و مقدرتها على انتاج أجنة فى المعمل بعد التجميد مقارنة بالمجموعة الضابطة. كما ثبت أن اضافة السكروز الى سائل تحميد الخلايا الغير نامية والنامية يؤدى الى زيادة واضحة فى معدل الانقسام مقارنة بالتريهالوز. على العكس فان اضافة التريهالوز الى سائل تجميد أجنة الأبقار أدت الى الحصول على نتائج أفضل مقارنة بالسكروز. بالاضافة الى أن أفضل المعاملات التى يمكن استخدامها فى تجميد بويضات الأبقار هى البولي فينيل بيروليدون + السكروز حيث سجلت هذة المعاملة أعلى معدل للخلايا ذات الشكل الطبيعى ( 91.63 ± 2.45 و 94.33 ± 0.55 )، معدل الانقسام ( 41.45 ± 0.66 و 44.00 ± 1.27 )، الطور التوتى ( 36.37 ± 0.77 و 39.44 ± 1.57 ) و البلاستيولا ( 13.50 ± 0.98 و 18.39 ± 1.65 ) للبويضات الغير نامية والنامية على التوالى. كما تبين أن أفضل الاضافات التى يمكن استخدامها لتجميد أجنة الأبقار المنتجة فى المعمل هى البولى ايثيلين جليكول + التريهالوز حيث كان معدل الأجنة الطبيعية الشكل ( 85.94 ± 0.54 )، معدل تطورالطورالتوتى ( 57.48 ± 1.58 ) و مرحلة البلاستيولا ( 52.14 ± 2.67 ).
يمكن تلخيص النتائج التى تم الحصول عليها فى أن أفضل المعاملات هى اضافة البولي فينيل بيروليدون الى سائل تجميد بويضات الأبقار المحتوى على السكروز أما بالنسبة لأجنة الأبقار فان اضافة البولى ايثيلين جليكول + التريهالوز الى سائل التجميد المستخدم هى الأفضل. كما ثنت أن أفضل المراحل التى يمكن استخدامها هى البويضات النامية و الطور التوتى مقارنة بالبويضات الغير ناضجة و مرحلة البلاستيولا على التوالى.