الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 252 |  |  |
| | | from | 252 | | |
Abstract
الكليجونم بولي جونويدس (الارطه) هو نبات الصحراء يستخدم في الطب الشعبي لأمراض المعدة، وعلاج وجع الاسنان و تقرحات اللثة. قد ذكر ان الزهور الطازجة بها نسبة مرتفعة من المكونات السكرية و النيتروجينية و لذلك يمكن أن تؤكل. ترجع أهمية النبات الطبية الي نشاطة كمضاد للقرحة والالتهابات، خافض لمستوى السكر، مضاد للسرطان و مضادات للأكسدة.
وقد اشتملت هذه الدراسة على الأتى:
الجزء الأول: مسح كيميائي و دراسة فيتوكيميائية ويشمل
الفصل الأول: المسح الكيميائى الأولى للاوراق والسيقان
ويشتمل هذا الفصل على مسح كيميائى أولى للمستخلص الكحولي ٧٠٪ لكل من اوراق وسيقان النبات محل البحث من حيث وجود الأنواع المختلفة من نواتج الأيض الثانوية. أسفر المسح الكيميائى الأولى عن وجود كلا من المواد الكربوهيدراتية و/أو الجلوكوزيدات, الاستيرولات و/أو التربينات الثلاثية, العفصيات و الفلافونيدات الحرة و/أو المقترنة و عدم وجود المكونات المتسامية, المواد الطيارة, الصابونينات, القلويدات و/أو القواعد النيتروجينية, الأنثراكينونات الحرة و المقترنة والجليكوزيدات القلبية.
الفصل الثانى: إستخلاص الأوراق والسيقان بالمذيبات المختلفة وإختبار الخلاصات و فصل المركبات
تم إستخلاص مسحوق أوراق و سيقان النبات (2 كجم من كل منهما) باستخدام ٧٠٪ كحول ثم تجزئة المستخلص الكحولي باستخدام كل من الهكسان و ثنائى كلوريد المثيلين و خلات الإيثيل و البيتانول على التوالى. تم وزن الخلاصات الخالية من المذيب وتحديد نسبتها وتسجيل الخواص الطبيعية لها. وقد تم عمل مسح كروماتوجرافي لكل من الخلاصات الأربعة بإستخدام كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة على ألواح السيليكاجيل ومن هذه الدراسة يمكن إستنتاج التالى:
1. النسبة المحصلة لخلاصات خلات الإيثيل والبيتانول اعلي في الأوراق و السيقان عن خلاصات الهكسان وثنائى كلوريد المثيلين .
2. الاستيرولات و/أو التربينات الثلاثية شكلت معظم مكونات خلاصة الهكسان وثنائى كلوريد المثيلين بإضافة إلى القليل من الفلافونيدات فى خلاصة ثنائى كلوريد المثيلين ومن الناحية الأخرى سادت مركبات عديدة الفينولات فى خلاصات خلات الإيثيل و البيتانول.
3. إعتماداعلى الوصف الكروماتوجرافى تم اختيار خلاصات الهكسان للسيقان و خلات الإيثيل و البيتانول للأوراق لفصل مكوناتهم الاساسيه.
تم تجزئة مستخلص الهكسان باستعمال كروماتوجرافيا العمود المعبأ بالسيليكاجيل و مستخلص خلات الإيثيل و البيتانول باستعمال كروماتوجرافيا العمود المعبأ ببولي اميد وتم فحص الأجزاء المجمعة من العمود باستخدام كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة. ثم تجميع الأجزاء المتشابهة ووضعها مرة اخرى على عمود كروماتوجرافيا المعبأ بسيفاديكس. وأسفرت هذه الدراسة عن فصل مركب واحد, ستة و تسعة مركبات بالترتيب.
الفصل الثالث: فحص خلاصة الهكسان
أ. التحليل بإستخدام كروماتوجرافيا الغاز- السائل: تم تجزئة خلاصة الهكسان لكل من الأوراق والسيقان إلى مواد غير قابلة للتصبن ومواد متصبنة وقد تم تحليل كل منها على حدة بواسطة كروماتوجرافيا الغاز- السائل.
1. تحليل المواد غير المتصبنة
أظهرت نتائج تحليل كروماتوجرافيا الغاز-السائل اختلافات فى المحتوى الهيدروكربونى والإستيرولى لكل من الأوراق والسيقان على النحو التالى:
وجد أن عدد المكونات التى تم التعرف عليها فى ألأوراق (24) اعلي مقارنة بالسيقان (17) و تمُثل نسبة كمية المواد الكلية المتعرف عليها (79.9٪) فى ألاوراق و (80.07٪) في السيقان.
نسبة الهيدروكربونات أعلى في أوراق (70.07٪) مما كانت عليه في السيقان (31.06٪). بينما الاستيرولات و المواد ثلاثية التربين التى تم التعرف عليها في السيقان (49.01٪) اعلي من التي في الاوراق (9.83٪).
تتراكوسان كان الهيدروكربونية الرئيس في الأوراق (14.28٪) في حين كان هيبتاديكان كان هو السائد في السيقان (5.26٪) بينما الاستيرول الاعلي كان بيتاسيتوستيرول فى كلا العضوين (34.07 و 7.00 ٪ على الترتيب). بالنسبة للمواد ثلاثية التربين، الفااميرين هو المركب الوحيد الموجود فى الاوراق فقط بنسبة قليله.
2. تحليل الإسترات الميثيلية للأحماض الدهنية
أظهرت تحاليل كروماتوجرافيا الغاز- السائل للأحماض الدهنية للاوراق و السيقان أن:
المواد الكلية المتعرف عليها 10 و 12 في الأوراق والسيقان و تمثل 91.77٪ و 83.40٪ من إجمالي تكوين الأحماض الدهنية من على التوالي.
النسبة المئوية من إجمالي مجموع الأحماض الدهنية غير المشبعة التي تم التعارف عليها ما يقرب من 2 أضعاف نسبة الأحماض المشبعة في كلا العضوين. وكانت نسبة مجموع الأحماض االمشبعة أعلى في أوراق (33.90٪) عن السيقان (26.38٪)، في حين أن الأحماض الدهنية غير المشبعة متعادلها في كلا العضوين (57.87 و 57.02٪ علي التوالي).
2. حمض البالمتيك الحمض الدهنى المشبع الرئيسى في كلا من الاوراق و السقان (17.84 و 15.49٪ على التوالي). تم الكشف عن حمضي اللوريك والميريستيك في السيقان (0.74 و 0.52٪ على التوالي).
حمض الأوليك هو الحمض الدهنى الأحادية الغيرالمشبع السائد في الأوراق و السيقان (28.10 و28.52٪ على التوالي)، في حين كان حمض اللينوليك السائد الأحماض الدهنية غير المشبعة (22.45 و 17.74٪ على التوالي) في الأوراق والسيقان.
الفصل الرابع: التعرف علي المركبات المفصوله
أجريت توضيح بنية المركبات المفصولة من مستخلص الهكسان للسيقان وخلات الإيثيل والبيوتانول للأوراق استنادا إلى التقنيات الطيفية؛ UV، MS، و NMRو هي كالاتي :
C1 بيتاسيتوستيرول C9 كامفيرول-٣-جلوكوزيد
C2 كامفيرول C10 كويرسيتين-٣-رامنوزيد
C3 كويرسيتين C11 كامفيرول-٣-جلوكيورنويد
C4 تكسفولين C12 كويرسيتين-٣-جلوكيورنويد
C5 كاتيشين C13 كامفيرول-٣ (6′′ بيوتيل-جلوكيورنويد)
C6 ديهيدرو داي كاتيشين C14 كويرسيتين-٣ (6′′ بيوتيل-جلوكيورنويد)
C7 جالليك اسيد C15 كامفبيرول-٣ (6′′ ميثيل-جلوكيورنويد)
C8 كويرسيتين-٣-جلوكوزيد C16 كويرسيتين-٣ (6′′ ميثيل-جلوكيورنويد)
المركب C13 تم فصله فى هذه الدراسة لأول مرة من الطبيعة بينما المركبات الأتية:
C4 ,C6 ,C9 ,C14 , 5C1 و C16 تم فصلهم لأول مرة من فصيلة الكليجونم.
الجزء الثانى: تعيين المحتوى الكمى للمواد الفينولية للاعضاء المختلفه و يشمل
1. استخدام كروماتوجرافيا السائل ذات الأداء العالى
و قد وجد أن هناك اختلاف نسبي بين محتوي الاعضاء المختلفه، ولكن تبين اختلاف بسيط بين كل من الثمار و الزهور وايضا بين السيقان و اللحاء و كان محتوي الفلافونيدات جلوكوزيدات اعلي في جميع الاعضاء مقارنه بالفلافونيدات الحره.
الزهور و الثمار هي الأكثر محتوي في مركبات الفلافونيدات (كامفيرول، كويرسيتين، كويرسيتين-٣-جلوكوزيد، كامفيرول-٣- جلوكوزيد، كويرسيتين-٣-رامنوزيد، كامفيرول-٣-جلوكيورنويد، كويرسيتين-٣-جلوكيورنويد) بحيث يمكن استخدامها بوصفها المصدر الرئيسي لهذه المركبات. وعلاوة على ذلك، الأوراق والسيقان واللحاء هي الأكثر غني بالتكسفولين والكاتيشين.
2. المحتوى الفينولي الكلي
كان المحتوى الفينولي الفلافونيدات في الاعضاء المختلفة في ترتيب الأوراق = اللحاء> السيقان> الزهور> الثمار مع قيم 281.51، 280.60، 95.01، 74.71 و 27.88 ميكروغرام GAE/جم، على التوالي. كانت هناك فروق بين العينات المختبرة بينما المحتوى الفينولي للأوراق واللحاء هي الأعلى مقارنة لغيرها من الاعضاء.
3. محتوى الفلافونويد الكلي
كان محتوى الفلافونيدات في الاعضاء المختلفة في ترتيب الأوراق> اللحاء> الزهور> السيقان> الثمار مع قيم 257.41، 217.21، 101.91، 87.45 و 53.93 ميكروغرام RE/جم، على التوالي.
الجزء الثالُث : دراسة بيولوجية و تشمل
1. دراسه النشاط الاستروجيني للخلاصات المختلفه للأوراق
أوضحت دراسة السمية الحادة فى فئران التجارب للمستخلصات الاربعة أنها آمنة حتى 2.5 جم/كجم من وزن الجسم ولا توجد أي أعراض للسمية وهى غير قاتلة. استناداً على هذة النتائج، تم تحديد الجرعات التى ستستخدم فى الدراسات البيولوجية وهى 75 ، 150 مجم/كجم من وزن الجسم.أظهرت الدراسه ان جميع الخلاصات ذات طبيعة استروجينيه بنسب مختلفة و كان مستخلص الميثيلين كلوريد هو الاعلي ولذلك يمكن أن يكون هذا النبات مفيد كمصدر طبيعي آمن للنشاط الاستروجيني للنساء بعد سن اليأس.
2. دراسه للخلاصات المختلفه للأوراق كمضادات للميكروبات
تمت دراسة التأثير الميكروبي و الحد الأدنى للتركيز المثبطة للستخلصات المختلفة ضد
بكتيريا موجبة الجرام باسيلس سبتيلس
(RCMB 0000101(5) استافيلوكوكس اوريس (RCMB 010027)
بكتيريا سالبة الجرام الكلبسيلة الرئوية
(RCMB 0010093(12) السودوموناس ايروجينوزا (RCMB 000102(3)
فطريات الكانديدا البيكانز
(RCMB 05035) اسبيرجلوس فيمجاتس
(RCMB 02564)
و قد اظهرت النتائج أن:
مستخلص الميثيلين كلوريد ذات نشاط كبير ضد كل أنواع البكتيريا المختبرة, مستخلص كل من الهكسان والبيوتانول نشاط كبير ضد اسبيرجلوس فيمجاتس و البكتيريا موجبه الجرام ونشاط معتدل ضد الكلبسيلة الرئوية ولكن غير نشط ضد السودوموناس ايروجينوزا و الكانديدا البيكانز بينما خلات الايثيل لها نشاط معتدل ضد كل أنواع البكتيريا المختبرة باستثناء السودوموناس ايروجينوزا و الكانديدا البيكانز.
أظهرت دراسة MIC أن اسبيرجلوس فيمجاتس، جميع البكتيريا موجبة الجرام و الكلبسيلة الرئوية هي أكثر عرضة لمستخلص الهكسان، الميثيلين كلوريد والبيوتانول مع قيم MIC تتراوح بين 0.03 و 31.25 ملغ/مل في حين أن قيم المضادات الحيوية القياسية تتراوح بين 0.007 و 1.95 ملغ/مل لكن السودوموناس ايروجينوزا و الكانديدا البيكانز عرضة لمستخلص الميثيلين كلوريد فقط مع القيم MIC تتراوح بين 1.95 و 3.9 ملغ/مل في حين أن قيم المضادات الحيوية القياسية MIC تتراوح بين 0.49 و 1.95 ملغ/مل.
3. دراسة تأثير النشاط السمية للخلايا
تم دراسه تأثير المركبات المفصولة علي تثبيط نمو بعض الخلايا السرطانيه البشرية MCF-7 و HePG-2 وقد اوضحت النتائج أن المركبات المفصولة لديها نشاط أعلى ضد خلايا MCF-7 عن HePG-2, المركبات الحرة (كويرسيتين، كاتشين، تكسفولين و جالليك اسيد) لديها نشاط أعلى بالمقارنة مع الجليكوزيدات باستثناء كامفيرول. وكان كويرسيتين اكثرهم كفاءه ضد كل من HePG-2 و MCF-7 (IC50 = 4.88 و 0.87 ميكروجرام/مل علي التوالي)
4. دراسة تأثير المستخلص الكحولى للاعضاء المختلفه كمضادات للأكسدة:
أسفرت نتائج تجربة (DPPH) المضادة للأكسدة لكل من المستخلصات الكحوليه في الاجزاء المختلفة للنبات أن اللحاء > الأوراق > الزهور> السيقان > الثمار مع قيم 450.30، 398.10، 369.91، 148.11 و 2.95 ميكروجرام AEAC/جم على التوالي و قد وجد أن هذا علي ارتباط مع ترتيب المحتوى الفينولي الكلي و محتوى الفلافونويد الكلي لهذة الاجزاء لذلك من المتوقع أن هذه المواد الكيميائية قد تكون مسؤولة عن هذا النشاط.