الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 141 |  |  |
| | | from | 141 | | |
Abstract
مرض الكامبيلوباكتر المعوى هو بسبب عدوى بكتيرية حادة منتشرة فى جميع أنحاءالعالم. وميكروب الكامبيلوباكتر يشمل العديد من الأنواع التي تسبب العدوى بالمرض وأهم العترات التى تحدث الاصابة بالمرض ميكروب الكامبيلوباكتر جيوجوناى والكامبيلوباكتر كولاى وقد تم عزلهم من أمعاء الارانب وهذه الانواع مقاومة للحرارة.
يتم فى هذه الدراسة دراسة طرق مختلفة لتشخيص ميكروب الكامبيلوباكتر فى الارانب و يتم ذلك بعد :
1) عزل وتصنيف الانواع االمختلفة للكامبيلوباكترالمعزولة من عينات الأرانب بالطرق التقليدية.
2) التوصيف الجزيئي لمعزولات الكامبيلوباكتر بأستخدام أختبار البلمرة المتسلسل
3) أستخدام الحامض النووى لتحديد جين الضراوة للكامبيلوباكتر جيوجوناى وتحديد مستوى السمية فى العترات المعزولة من عينات الارانب.
أجريت هذه الدراسة على الأرانب فى الفترة من فبراير 2015 حتى أبريل 2016. تم أخذ عينات من الأرانب في مختلف الأعمار. وكان مجموع عدد عينات الأرانب في هذه الدراسة 230 عينة عبارة عن ”مسحات شرجية وعينات من الكبد وعينات من الأمعاء وعينات من مياه الشرب وعينات من العلف ” من الأرانب السليمة ظاهريا والمريضة التى تعانى من الإسهال في المزارع المختلفة. تم نقل العينات التي تم جمعها بطريقة معقمة في الثلج وارسلها فى اسرع وقت ممكن إلى معمل الكامبيلوباكتر في قسم الأمراض التناسلية ”معهد بحوث التناسليات بالهرم ” لفحص البكتيريا.
تم فحص جميع عينات الأرانب لعزل ميكروبات الكامبيلوباكتير. تم زرع العينات في ميديا الثيوجليكولات وتم حفظهاعند 42 درجة مئوية لمدة 48 ساعة فى جو يحتوى على 10% ثانى اكسيد الكربون و 5% أوكسجين و 85% نيتروجين ثم تم الفحص باستخدا م الميكروسكوب Phase contras لتحديد حركة الميكروب .جميع المعزلات اجرى عليها الاختبارات االبيوكيميائية لتحديد العترات المختلفة للكامبيلوباكتر(الكاتالاز، أوكسيديز، اختبار التحلل الهيبوريت، الجلايسين 1% ، كلوريد الصوديوم 3.5٪ اختبار المضادات الحيوية السيفالوثين وحمض الناليديكسيك). ثم تم تخزين المعزولات في درجة حرارة -70 درجة مئوية في الميديا المغذيه مع اضافة 15٪ جلسرين حتى اجراء التوصيف الجزيئي.
النتائــــــج :
تم فحص 230 عينة من الأرانب و أسفرت الدراسة عن عزل عدد 58عينة25.22 ٪ من الكامبيلوباكتر بعد الفحص المجهرى والاختبارات البيوكيميائية للمعزلات الإيجابية للكاتالاز، أوكسيديز، والنترات وأظهرت النتائج أن الانواع الاكثر تواجد هو الكامبيلوباكتر جيوجوناى 26 بنسبة (11.30%) والكامبيلوباكتر كولاى 15 بنسبة (6.52%) تليها الكامبيلوباكتر لارى 12بنسبة (5.22%) ثم الكامبيلوباكتر هيوانتستيناليس 5 بنسبة (2.17%).
وكانت نسبة الإصابة بالكامبيلوباكتر في محتوى الأمعاء (40٪) تليها المياه (30٪) ثم المسحات الشرجية (26.92٪) وفي الكبد (10٪). ارتفاع نسبة الميكروب في محتوى الأمعاء والمسحات الشرجية بسبب وجود ميكروبات الكامبيلوباكتر في أمعاء الأرانب دون ظهورأى أعراض مرضية . كانت نسبة الإصابة بالميكروب في عينات الأرانب المريضة بنسبة (32.04٪) تليها عينات الأرانب السليمة ظاهريا بنسبة (19.69٪).
كان تواجد ميكروبات الكامبيلوباكتر في عينات الأرانب السليمة ظاهريا أعلى في محتويات الأمعاء بنسبة (46.67٪) دون أي اعراض مريضة. تليها المسحات الشرجية بنسبة (21.33٪) ثم في عينات مياه الشرب للمياة الغير معالجة بنسبة (14.29٪) وفى عينات الكبد بنسبة (7.69٪).
وقد تم استخدام PCR للكشف عن معزولات الكامبيلوباكتر أثناء الدراسة وكانت جين (hipO) للكامبيلوباكتر جيوجوناى هو 323bp و (والكامبيلوباكتر القولونى glyA) من C.coli هو 126bp في الارانب المعزولة فى مناطق مختلفة بجمهورية مصر العربية.
وأسفرت النتائج على أيجابية عدد 51 عينة للكامبيلوباكتر باستخدام أختبار التفاعل النووى المتعدد بنسبة (22.17%) من المعزولات عبارة عن 27 معزولة أيجابية للكامبيلوباكتر جيوجوناى بنسبة (52.94%) عند 323 Bp و17 معزولة ايجابية للكامبيلوباكتر كولاى بنسبة (33.33%) عند 126 Bp وعدد 7 عترات للانواع الاخرى للكامبيلوباكتر بنسبة (13.73%).
وقد أظهرت الجينات الضارية للكامبيلوباكتر جيوجوناى (flaA، virB11) عند مستوى 855 نقطة و 494 نقطة على التوالي. ولكن العترات ذات التاثير السمى الشديد cytolethal التمددي (cdtB وcdtC) من الكامبيلوباكتر جبوجوناى ظهرت عند 495 نقطة و 555 نقطة على التوالي، مما يدل على ضراوة هذه المعزولات.
وأظهرت نتائج الدراسة أن كل المعزلات لميكروبات الكامبيلوباكتر تحتوى على جين flaA ومن ناحية أخرى، كان جين الضراوة لعترات الكامبيلوباكتر جيوجوناى virB11 موجودة في معزولات الكبد والامعاء بنسبة 50% تليها المعزولات من المسحات الشرجية بنسبة 35.71% .
• كلا من الكامبيلوباكتر جيوجوناى والكامبيلوباكتركولاي منتشربشكل كبير في مزارع الأرانب في مصر.
• ينبغي الرقابة على ملوثات مزارع الارانب بحيث يمكن تحديث أساليب الحماية حتى لا يتعرض الإنسان إلى الاصابة بالكامبيلوباكتر.
• الحاجة إلى مزيد من التحليل لعينات الأرنب باستخدام طرق حديثة للتشخيص مقارنة بطرق الزراعة التقليدية لتقييم قابلية تطبيق طريقة للكشف عن ميكروبات الكامبيلوباكتر فى البيئة.
• • يجب إجراء دراسات وبائية واسعة النطاق في مناطق جغرافية مختلفة لاكتشاف انتشار وحجم وأهمية العدوى بالكامبيلوباكترفي الحيوانات والطيور.
• يمكن الكشف عن العترات المرضية للكامبيلوباكتركأداة بسيطة وسريعة للعزل والتصنيف من المصادر المختلفة.
• الوقاية والسيطرة على الكامبيلوباكتر جيوجوناي في االارانب من شأنه أن يقلل من خطر التعرض البشري للاصابة بالمرض و سلامة الأغذية.
• تركيز الضوء على الصحة العامة والحاجة إلى التشخيص المبكر للكامبيلوباكتر جيوجوناى في عينات الأرانب للمستهلكين والمعالجين.
• • تطبيق استراتيجيات المکافحة الفعالة لمنع العدوى علی المزارع الحيوانية والداجنة وزيادة الوعى يساعد على الحد من انتشار العدوى.