Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Biochemical and phytochemical studies of (Lotus peregrinus L.) on experimentally induced mammary cancer in rats /
المؤلف
Abd Elkawy, Heba Atef Khalaf.
هيئة الاعداد
باحث / هبه عاطف خلف عبد القوى
مشرف / سامى على حسين عزيزة
مناقش / سمير عبداللطيف عبدالعال
مناقش / شلبية شحات امام
الموضوع
Rats Diseases. Breast Cancer.
تاريخ النشر
2019.
عدد الصفحات
306 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
Veterinary (miscellaneous)
تاريخ الإجازة
01/01/2019
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية الطب البيطري - الكيمياء الحيوية
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 318

from 318

Abstract

تقدر منظمة ابحاث السرطان العالميه ان سرطان الثدي هو ثاني اكثر انواع السرطان شيوعا فى العالم. العوامل التي تزيد من احتمالية الإصابة بسرطان الثدي: نوع الجنس؛ النساء أكثر عرضة للإصابة بسرطان الثدي من الرجال، السمنة، وعدم ممارسة الرياضة، شرب الكحول، العلاج بالهرمونات البديلة خلال فترة انقطاع الطمث ، التعرض للإشعاع الأيوني، البلوغ المبكر للفتاة، إنجاب الأطفال في عمر متأخر أو عدم إنجاب الأطفال، والتقدم في العمر.ونظرا لمضاعفات العلاج الكيمائى والاشعاعى فى علاج السرطانات لذا كان اتجاه الباحثين لايجاد بدائل لمثل هذه العلاجات. وبالتالى أصبح من الضرورى دراسة المستخلصات النباتية والمواد الفعالة الموجودة بداخلها ودراسة أهميتها ونشاطها البيولوجى والتعرف على التركيب الكيميائى لهذه المركبات لأستخدامها فى التطبيقات الطبية وغيرها.تعتبر النباتات الطبية والعطرية من أهم المنتجات الطبيعية التى تمثل مصدرا هاما وأساسيا لإنتاج العقاقير والأدوية التى تستخدم فى علاج الكثير من الأمراض التى تصيب الإنسان والتى إ نتشرت فى الأونة الأخيرة لما تحتويه هذه النباتات من مواد فعالة ذات نشاط بيولوجى ولما لها من أهمية فى الطب الشعبى وتستخدم هذه النباتات فى علاج الكثير من الأمراض مثل أمراض السرطان , البلهارسيا , الإيدز , مرض السكر , الذبحة الصدرية , تسكين الألام و لعلاج القروح الإلتهابات الجلدية والإضطرابات المعوية وغيرها .مبررات الدراسة: انتشار مرض سرطان الثدى ومحاولة إيجاد بديل طبيعى آمن للعلاج.عدم وجود دراسات كيميائية على نبات الحوربيت (اللوتس بيرجرينس).عدم وجود دراسة بيولوجية مستفيضة على نبات الحوربيت (اللوتس بيرجرينس).أهداف الدراسة:•دراسة المحتوى الكيميائى لنبات الحوربيت (اللوتس بيرجرينس).•تقييم تأثير المستخلصات المتتالية القطبية لنبات الحوربيت (اللوتس بيرجرينس) على سرطان الثدى المحدث تجريبيا فى إناث الجرذان .•فصل وتنقية وتعريف المركبات الفعالة الموجودة فى المستخلصات الأكثر فاعلية .أهم النتائج:•تم تجميع الأجزاء الهوائية للنبات من منطقة مرسي مطروح (وادي حابس) (مايو 2015).تم عمل مسح كيميائي على المستخلص الكحولي للاجزاء الهوائيه للنبات للتعرف على المواد الفعالة الموجودة بالنبات وقد وجد إنه يحتوى على فلافونيدات وجليكوسيدات وتانينات وإستيرولات وتربينات.•تم تقدير بعض الثوابت الدستورية للنبات مثل تقدير الرماد الكلى والرماد الذائب وغير الذائب فى كل من الماء والحمض والألياف الكلية .تقدير محتوي النبات من الكربوهيدرات الكلية والذائبة وغير الذائبة.•تم التعرف علي السكريات الحرة والمرتبطة بإستعمال التحليل الكروماتوجرافى السائل الفائق الدقة كمياً وكيفياً واتضح ان النبات يحتوى علي 12 من السكريات الحرة و10 من السكريات المرتبطة .• السكريات الحرة : سجل L-Rhaminose (21.9136 )اعلي نسبه للسكريات الحرة كانت اقل نسبه ل Manitol (0.381)•السكريات المرتبطة : سجل Xylose (29.425%)اعلي نسبه بينما سجل Sorbitol (0.040 اقل نسبه للسكريات المرتبطه .•تم تقدير المحتوي الكلي للنيتروجين والبروتين للنبات. •تمت دراسة محتوى النبات من الأحماض الأمينية الداخلة فى تركيب البروتين بإستعمال جهاز تحليل الأحماض الأمينية.إتضح أن الأجزاء الهوائيه للنبات تحتوي علي 17 حمض أميني في صورة مرتبطه.• الاحماض الامينية الداخلة فى تركيب البروتين: حيث سجل Aspartic acid (8.526 mg/gm) اعلي نسبه للاحماض الامينيه المرتبطه بينما سجل Methionine (0.108 mg/gm) اقل نسبه للاحماض الامينيه المرتبطه الموجودة في الاجزاء الهوائيه للنبات.•تم دراسة الخواص الطبيعية والكيميائية للدهون الموجودة فى النبات مثل الرقم الحامضى والرقم اليودى والتصبن والأسترة.
• تم فصل وتعريف الأحماض الدهنية المشبعة والغير مشبعة , والمواد الهيدروكربونية والإستيرولات بإستعمال جهاز GLC التحليل الكروماتوجرافى الغازى السائل كمياً وكيفياً والذي أوضح أن الأجزاء الهوائيه للنبات تحتوي علي 14 من هيدروكربونات و3 من الاستيرولات;
• المواد الهيدروكربونية: سجل Eicosane (8.027%) اعلي نسبة بينما سجل Tetradecane (0.496 %), اقل نسبة للمواد الهيدروكربونية, وكانت اعلي نسبه للاستيرولات ل Stigamasterol (7.79).
• كما تبين وجود 8 من الاحماض الدهنية المشبعة و4 غير مشبعة بنسب مئوية مختلفة لكل منها.
• الأحماض الدهنية: سجل Myristic acid (4.733%) أعلي نسبة للاحماض الدهنية المشبعة و Arashidic acid (1.873%) اقل نسبه للاحماض الدهنية المشبعة وسجل Linoleic acid (18.489) أعلي نسبه للاحماض الدهنية الغيرالمشبعة وسجل (1.286) Palmitoleic اقل نسبة للاحماض الدهنية الغير مشبعة.
• تم عمل استخلاص النبات بالمذيبات العضوية المختلفة مع عمل مسح كيميائي للمركبات الفعالة الموجودة بكل مستخلص (diethyl-ether, chloroform, ethyl acetate , 70 % ethanol and water) .
• تم عمل مسح لتاثير هذة المستخلصات المتتالية القطبية للنبات كمضادات للسرطان باستخدام خلايا سرطان الثدي (MCF7 ) لتحديد مدى فاعلية هذة المستخلصات المتتالية القطبية للنبات علي خلايا سرطان الثدي (MCF7 ) . وسجل مستخلص الداى اثيل اثير ( 26.91 %) اعلي تاثير كمضاد لخلايا سرطان الثدي وياتي في الترتيب الثاني في الفاعليه مستخلص الاثيل اسيتات ((37.76 كمضاد لخلايا سرطان الثدى .
• باستخدام جهاز (HPLC) تم تحديد المركبات الفينولية الموجودة فى مستخلص الداي اثيل اثير وتم ايضا تحديد المركبات التربينيه باستخدام جهاز ( (GC-MS.
• وايضا تم فصل بعض المركبات الفينوليه من مستخلص الداي اثيل اثير باستخدام عمود من السيليكا ثم تنقية المركبات الفينولية بطرق الفصل الكروماتوجرافى المختلفة و تم عمل (C13 وال NMR H1 و UV ) وتم التعرف عليها من خلال البيانات التي تم الحصول عليها .
• وتم فصل بعض المركبات (الفلافونيدات) من مستخلص الاثيل اسيتات باستخدام عمود من البولي اميد ثم فصل وتنقية المركبات الفينولية بطرق الفصل الكروماتوجرافى المختلفة و تم عمل (C13 وال NMR H1 و UV ) وتم التعرف عليها من خلال البيانات التي تم الحصول عليها.
• تم استخدام مستخلص الداي اثيل اثير ومستخلص الاثيل اسيتات لنبات اللوتس بيرجرينس لمعرفة مدى تاثيرهم فى علاج سرطان الثدي والتخلص من الخلايا السرطانية فى الثدي المحدثة تجريبيا بواسطة الدا ميثيل بينز انثراثين والتى تعتبر اكثر المواد شيوعا فى احداث سرطان الثدي فى الجرذان .
• وقد أجريت هذه الدراسة على عدد 90 من اناث الجرذان البيضاء وتتراوح أعمارها بين 42 يوم وأوزانها بين 70-85 جم تم احضار هذه الجرذان من مزرعة حلوان التابعة لهيئة المصل واللقاح بالقاهرة .وقد تم وضع هذه الجرذان فى أقفاص معدنية منفصلة بحجرة خاصة لرعاية حيوانات التجارب بقسم الكيمياء الحيوية بالكلية ، وزودت بالمياه العذبة النقية وأبقيت الجرذان على ظروف بيئية وغذائية ثابتة طوال أربعة عشر يوماً للتأقلم على الظروف الجديدة قبل بداية التجربة .
تم تقسيم الجرذان إلي ستة مجموعات على النحوالتالى:
۱(المجموعة الأولى ( المجموعة الضابطة): اشتملت على 15 جرذ ولم تعطى أية أدوية واستخدمت كمجموعة ضابطة طبيعية للمجموعات الأخرى .
٢(المجموعة الثانية ( المجموعة المحدث بها سرطان ا لثدي تجريبياً ):اشتملت على 15 جرذ وقد تم تجريعها بمادة ال داي ميثيل بنزانثراثين (2.5 مجم/ للجرذ) مرتين فقط فى بداية التجربه وبعد 15 يوم من بداية التجربة ; وايضا تم حقنها بمادة المدروكسي بروجسترون اسيتات (25 مجم/ للجرذ) وذالك في اليوم الثلاثين من بداية التجربه لاحداث سرطان الثدي .
٣(المجموعة الثالثة: (مجموعة الوقايه بمستخلص الداي اثيل اثير): اشتملت على 15 جرذ وقد وقد تم تجريعها بمادة ال داي ميثيل بنزانثراثين (2.5 مجم/ للجرذ) مرتين فقط فى بداية التجربه وبعد 15 يوم من بداية التجربة ; وايضا تم حقنها بمادة المدروكسي بروجسترون اسيتات(25 مجم/ للجرذ) وذالك في اليوم الثلاثين من بداية التجربه لاحداث سرطان الثدي .وفى اليوم السادس والعشرون تم تجريعها بمستخلص الداي اثيل اثير المذاب فى زيت التوين بتركيز 50 مجم/كجم يوم بعد يوم عن طريق الفم حتى نهاية التجربه .
4) المجموعة الرابعة: (مجموعة الوقايه بمستخلص الاثيل اسيتات): اشتملت على 15 جرذ وقد وقد تم تجريعها بمادة ال داي ميثيل بنزانثراثين (2.5 مجم/ للجرذ) مرتين فقط فى بداية التجربه وبعد 15 يوم من بداية التجربة; وايضا تم حقنها بمادة المدروكسي بروجسترون اسيتات(25 مجم/ للجرذ) وذالك في اليوم الثلاثين من بداية التجربه لاحداث سرطان الثدي .وفى اليوم السادس والعشرون تم تجريعها بمستخلص الداي الاثيل اسيتات المذاب فى زيت التوين بتركيز 75مجم/كجم يوم بعد يوم عن طريق الفم حتى نهاية التجربة.
5(المجموعةالخامسه :(مجموعة العلاج بمستخلص الداي اثيل اثير ): اشتملت على 15 جرذ وقد وقد تم تجريعها بمادة ال داي ميثيل بنزانثراثين (2.5 مجم/ للجرذ) مرتين فقط فى بداية التجربه وبعد 15 يوم من بداية التجربة ; وايضا تم حقنها بمادة المدروكسي بروجسترون اسيتات(25 مجم/ للجرذ) وذالك في اليوم الثلاثين من بداية التجربه لاحداث سرطان الثدي .وفى بداية الاسبوع السادس عشرتم تجريعها بمستخلص الداي اثيل اثير المذاب فى زيت التوين بتركيز 50مجم/كجم يوم بعد يوم عن طريق الفم حتى نهاية التجربه .
6) المجموعةالسادسه :(مجموعة العلاج بمستخلص الاثيل اسيتات) : ): اشتملت على 15 جرذ وقد وقد تم تجريعها بمادة ال داي ميثيل بنزانثراثين (2.5 مجم/ للجرذ) مرتين فقط فى بداية التجربه وبعد 15 يوم من بداية التجربة ; وايضا تم حقنها بمادة المدروكسي بروجسترون اسيتات(25 مجم/ للجرذ) وذالك في اليوم الثلاثين من بداية التجربه لاحداث سرطان الثدي .وفى بداية الاسبوع السادس عشرتم تجريعها بمستخلص الاثيل اسيتات المذاب فى زيت التوين بتركيز 75مجم/كجم يوم بعد يوم عن طريق الفم حتى نهاية التجربه .
.
**عينـــات الــدم:
اولا: تم تجميع عينات الدم عن طريق وخذ الجيب الوريدي خلف العين باستخدام الأنابيب الشعرية وتم تجميع كمية الدم فى أنابيب اختبار جافة، نظيفة، معقمة ومحكمة الإغلاق وتم ترك العينة لمدة ٣۰دقيقة فى درجة حرارة الغرفة حتى يتجلط الدم ويبدأ انفصال المصل (السيرم) ، وتم فصل السيرم تماماً بواسطة جهاز الطرد المركزي وذلك عند سرعة ٣۰۰۰ لفة في الدقيقة لمدة ۱٥دقيقة، بعدها تم تجميع السيرم في أنابيب إبندورف جافة ومعقمة بواسطة الماصة الأوتوماتيكية وتم حفظ السيرم في المجمد عند درجة 20˚ مئوية تحت الصفر وذلك لإجراء التحاليل الاتيه :
1) ميكرو اران ايه 145
2) ميكرو اران ايه 155
ثانياً: عينات الأنسجة (الغدد اللبنية) :
بعد الحصول على الكميات الكافية من الدم، تم ذبح الجرذان وشق الصدر وفصل الغدد اللبنيه ثم غسلها جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (٠٫٩٪) ثم وضعها فى ورق فويل وتم الاحتفاظ بها فى المجمد عند درجة حرارة ٨٠˚تحت الصفر وذلك لطحنها . وتم طحن الغدد اللبنيه بنسبة ۱٠٪ (وزن/حجم) وذلك باستخدام هوموجينايزر كهربى ثم فصل العينات بواسطة جهاز الطرد المركزى ثم تجميع الجزء الرائق من السائل ووضعها فى أنابيب معقمة وجافة ثم حفظها فى درجة حرارة ٨۰˚تحت الصفر لإجراء التحاليل البيوكيميائية عليهم ، وقد استخدمت هذه العينات فى إجراء القياسات الاتية :
1 نشاط إنزيم الكاتاليز
2 مستوى الجلوتاثايون المختزل
3 الأكسدة الفوقية للدهون (تركيز إل- مالون داى ألدهيد)
4 خلايا بيتا اللمفاوية -2
5 بروتين بى53
6 تركيز الكاسباس 3
7 الباكس
8 عامل نخر الورم – الفا
9 عامل النمو بيتا -2
10 عامل نمو بطانة الاوعية الدمويه
11 عامل نمو الانسولين -2

** عينات الهستوباثولوجى:
تم الحصول على عينات اخرى للغدد اللبنيه وتم حفظها فى فورمالين متعادل ۱٠٪ ، ثم تم تحضير العينات وصبغها بالصبغات الخاصة ووضعها على الشرائح ووضع الغطاء وتثبيته ثم تم فحصها ميكروسكوبياً وتوصيفها وتصويرها عن طريق متخصص فى علم الهستوباثولوجى.
** وقد أظهرت النتائج بعد تحليلها إحصائيا مايلى :-
** أولاً: عينـــــات الـــدم:
1) مستوي ميكرو ار-ان- ايه 145
 أظهرت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوي جين ميكرو ار-ان- ايه 145فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد زيادة معنوىة فى مستوي جين ميكرو ار-ان- اية 145في جرذان المجموعات التي تم وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ زيادة معنوية فى مستوي جين ميكرو ار-ان- اية 145في جرذان المجموعات الخامسه والسادسه التى تم علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
2) مستوي ميكرو ار-ان- ايه 515
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوي جين ميكرو ار-ان- ايه 155في جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الغدد اللبنية تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوي جين ميكرو ار-ان- اية 155 في جرذان المجموعات التي تم وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوي جين ميكرو ار-ان- اية 155في جرذان المجموعات الخامسه والسادسه التى تم علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
* ثانياً: عينـــــات الأنسجة ( الغدد اللبنية):
۱(انزيم الكاتاليز :
 أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى نشاط انزيم الكاتاليز فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد زياده معنوىه فى نشاط انزيم الكاتاليز فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ زياده معنوىه فى نشاط انزيم الكاتاليز فى الغدد اللبنية عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
(2 مستوى الجلوتاثيون المختزل فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى مستوى الجلوتاثيون المختزل فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد زيادة معنوية فى مستوى الجلوتاثيون المختزل فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ زيادة معنوية في مستوي الجلوتاثيون المختزل الكاتاليز فى الغدد اللبنية عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
3 (إل- مالون داى ألدهيد في الغدد اللبنية :
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى تركيز ال- مالون داى الدهيد فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة المحدث بها سرطان االثدى تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى تركيز ال- مالون داى الدهيد فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى تركيز ال- مالون داى الدهيد فى الغدد عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
(4 نشاط الكاسباس -9 جين و مستوي جين بروتين بى53 بالاضافة الي نشاط الباكس فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى كل من مستوى الكاسباس-9- جين ومستوي جين بروتين بى53 بالاضافة الي نشاط الباكس فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد زيادة معنوىة فى كل من مستوى الكاسباس-9- جين ومستوي جين بروتين بى53 بالاضافة الي نشاط الباكس عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ زيادة معنوية فى كل من مستوى الكاسباس-9- جين ومستوي جين بروتين بى53 بالاضافة الي نشاط الباكس عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
5) تركيز خلايا بيتا اللمفاوية -2 فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى خلايا بيتا اللمفاوية -2 فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوى خلايا بيتا اللمفاوية -2 فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوى خلايا بيتا اللمفاوية -2 فى الغدد عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
6) تركيز عامل نخر الورم – الفا فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى عامل نخر الورم – الفا فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوى عامل نخر الورم – الفا فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوى عامل نخر الورم – الفا فى الغدد عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
7) تركيز عامل النمو بيتا - 1فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى عامل النمو بيتا-1 فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوى عامل النمو بيتا-1 فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوى عامل النمو بيتا-1 فى الغدد عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
8) تركيز عامل نمو بطانة الاوعية الدمويه فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى عامل نمو بطانة الاوعية الدموية فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوى عامل نمو بطانة الاوعية الدموية فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوى عامل نمو بطانة الاوعية الدموية فى الغدد اللبنية عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
9) تركيز عامل نمو الانسولين - 2 فى الغدد اللبنية:
 أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى عامل نمو الانسولين - 2 فى الغدد اللبنية فى حالة جرذان المجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا وذلك عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة .
 ايضا وجد نقص معنوى فى مستوى عامل نمو الانسولين - 2 فى الغدد اللبنية عند وقايتها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الثالثة والرابعه مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي.
 كما لوحظ نقص معنوى فى مستوى عامل نمو الانسولين - 2 فى الغدد اللبنية عند علاجها بمستخلص الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات فى المجموعة الخامسة والسادسة مقارنة بالمجموعة الثانية المحدث بها سرطان الثدي .
** ثالثاً: نتائج التحليل الهستوباثولوجى لأنسجة الغدد اللبنية :
وباجراء الفحص النسيجى المرضى اظهرت النتائج الاتى:
۱-المجموعة الاولى (الضابطة): التركيب الطبيعى للغدد اللبنية .
٢-المجموعة الثانية (المعطاة المواد المسرطنة): اظهرت وجود احتقان والتهاب شديد فى انسجة الغدد مع تكوين ورم خبيث مع وجود فقد كامل للغشاء القاعدي كما اظهرت وجود مناطق متفرقه من تجمعات من الخلايا السرطانيه فى نسيج الغدد اللبنية وكانت الخلايا السرطانيه تعانى من كبر حجم نوايا هذه الخلايا مع تفرغها ووجود كثرة فى الماده الكروماتينيه للنواه كما اظهرت ايضا وجود تنقرس والتهابات شديده فى نسيج االغدد اللبنية واحتقان فى الاوعيه الدمويه للغدد اللبنية .
الخلاصــة
مما سبق نستنتج أن الداي ميثيل بنز انثراثين بالاضافة الي هرمون المدروكسي بروجسترون اسيتات كان لهما تأثير مسرطن على الغدد اللبنية حيث اتضح حدوث ارتفاع في مستوى مستوي ميكرو ار-ان- ايه 515 بالاضافة الي حدوث انخفاض في مستوي ميكرو ار-ان- ايه 145 فى المصل والتى تعتبر جينات محفزة ومثبطة للاورام الخاصة بسرطان الثدي . أيضا لوحظ نقص في مستوى كل من فى كل من مستوى الكاسباس-9- جين ومستوي جين بروتين بى53 بالاضافة الي نشاط الباكس في نسيج الغدد اللبنية علي العكس لوحظ وجود نقص معنوي في تركيز خلايا بيتا اللمفاوية -2 فى الغدد اللبنية المحدث بها سرطان الثدي تجريبيا .وايضا وجود زيادة فى مستوى إل- مالون داى ألدهيد في نسيج الغدد اللبنية في الجرذان المحدث بها سرطان الثدي . وأيضا حدوث انخفاض فى مستوى الجلوتاثيون المختزل ونشاط الكتاليز . لوحظ ايضا زيادة فى مستوى عامل النخر الفا وعامل النمو بيتا -1 بالاضافة الي عامل نمو الانسولين -2 في أنسجة الجرذان مما يؤكد حدوث سرطان الثدي . واخيرا لوحظ ايضا زيادة فى مستوي عامل نمو بطانة الاوعية الدمويه فى الغدد اللبنية المحدث بها سرطان الثدي بمادتي الداي ميثيل بنزانثراسين و هرمون المدروكسي بروجسترون اسيتات مما يؤكد تأثر الغدد اللبنية بهاتين المادتين.
كما أوضحت الدراسة إن الوقاية والعلاج بمستخلص الداي ايثيل ايثير والايثيل اسيتات أحدثا تعديلا ايجابيا في الدلالات الكيميائية الحيوية والجينات المختلفة المسؤلة عن التحول السرطاني في انسجة الغدد اللبنية في الجرذان .
لذلك توصى الدراسة بضرورة استغلال تلك المزايا الهائلة للمستخلصين (الداي اثيل اثير والاثيل اسيتات) لنبات اللوتس بيرجرنيس كمواد طبيعية وقائية مضادة للسرطان وإدخالهما كمواد فعالة فى صناعة العقاقير الطبية المستخدمة فى وقاية و علاج المرضى المصابين بسرطان الثدي .