الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 344 |  |  |
| | | from | 344 | | |
Abstract
يعد مرض ألزهايمر مرضًا صعبًا ، ولم تحقق العلاجات المعتمدة لمرض ألزهايمر النجاح المتوقع من استخدامها. لذلك ، من الضروري فهم المرض من جميع الجوانب ، وإيجاد استراتيجيات جديدة للتعامل مع مرض ألزهايمر بناءً على دراسة المسارات المرضية المختلفة لمرض ألزهايمر. الدراسة الحالية قد تلقي نظرة ثاقبة على مناهج جديدة للتعامل مع مرض ألزهايمر وذلك على أساس التفاعل بين فرط شحميات الدم ، و نظام الرنين أنجيوتنسن (RAS) مع تكوين الأميلود والمسارات المرضية الأخرى لمرض ألزهايمر.
أوضحت الدراسة الحالية الآثار الوقائية المحتملة والآليات الكامنة في عقاري البريندوبريل (perindopril) و السيمفستاتين (simvastatin) ضد مرض ألزهايمر وذلك بتجربتهم في النموذج الجديد لاستحداث مرض ألزهايمر عن طريق استخدام إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز (OVX/D-Gal/HFFD) في الفئران. ولتحقيق غرض وأهداف هذه الدراسة ، تم عمل تجربتين ؛ التجربة الأولى على بيريندوبريل (perindopril) ، والتجربة الثانية على سيمفاستاتين (simvastatin). تم تقسيم كل تجربة إلى ثلاث أجزاء ؛ دراسات سلوكية (Behavioral studies) للكشف عن الإصابة بمرض ألزهايمر ودرجتها ، ودراسات كيميائية حيوية (Biochemical studies) لفهم الآليات الكامنة المحتملة والآثار الوقائية للعلاجات المستخدمة ضد مرض ألزهايمر ، وأخيرًا الدراسات النسيجية (Histopathological studies) لتأكيد نتائج الدراستين الأخريين.
تم استحداث النموذج الجديد لـمحاكاة مرض ألزهايمر عن طريق إزالة المبايض جراحيا ، متبوعًا بحقن د-جالاكتوز 150) مجم / كجم / يوم ، حقن بريتوني (i.p.)) ، والتغذية على تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز يوميًا لمدة 30 يومًا (OVX/D-Gal/HFFD). تم تقسيم كل تجربة إلى ثلاث مجموعات ؛ الفئران الطبيعية والتي تلقت محلول توين-80 بتركيز 1٪ في محلول ملحي تركيزه 0.9٪ عن طريق الفم يوميا، والفئران المصابة بمرض ألزهايمر المستحدث عن طريق إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز ، وفئران ألزهايمر المستحدث عن طريق إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز والتي تم علاجها اما باستخدام البريندوبريل (0.5 مجم/كجم، يوميا عن طريق الفم) في التجربة الأولى أوباستخدام سيمفاستاتين (0.5 مجم/كجم، يوميا عن طريق الفم) في التجربة الثانية لمدة 30 يومًا. وقد تم تقييم التأثيرات الوقائية لكلا العقارين المعالجين باستخدام التحليل السلوكي ، والكيميائي الحيوي ، والتحليل النسيجي المرضي.
في الدراسات السلوكية ، تم تقييم الذاكرة المكانية باستخدام اختبارات متاهة موريس (MWM) و متاهة واي (Y maze) بينما تم تقييم الذاكرة غير المكانية باستخدام اختبار ادراك الأشياء الجديدة ((NOR. كما تم تقييم النشاط الحركي باستخدام اختبار المجال المفتوح ((OF. كما تم تقييم بوادر الاكتئاب المصاحبه لمرض ألزهايمر باستخدام اختبار السباحة القسرية ((FS. بعد نهاية الدراسات السلوكية ، تمت إزالة الحصين جراحيًا من كل فأر. حيث تم طحن الحصيننات من كل مجموعة طحنا متجانسا لاستخدامها في التحليل الكيميائي الحيوي بما في ذلك اختبارات ال المقايسة الامتصاصية المناعية للانزيم المرتبط (ELISA) ( 7 عينات من كل مجموعة) ، وتفاعل البوليمراز الكمي المتسلسل بالزمن الحقيقي ((qRT-PCR ، وتحليل لطخة ويسترن (Western blot) (3 عينات من كل مجموعة). مع العلم أن التحليل البيوكيميائي يتضمن تحليل علامات التكون الأميلودي ( تجمع الأميلودبيتا 1-42(Aβ 1-42) ، بروتين قاطع الأميلويد موقع بيتا 1BACE1)) ، أستيل كولين إستراز (AChE)، إنزيم خفض فاعلية الأنسولين (IDE)، نبريلايسين(NEP) ، بروتين تاو المفسفر ((p-Tau) ، علامات الاجهاد التأكسدي النيتروجيني والالتهاب العصبي (أوكسيديز نيكوتيناميد الأدينين ثنائي نيوكليوتيد الفوسفات 1 (NOX1) ، ثنائى ألدهايد المالون (MDA)، الانزيم المستحث لتصنيع أكسيد النيتريك iNOS) )، الانزيم العصبي لتصنيع أكسيد النيتريك (nNOS) ، عامل النخر الورمي ألفا (TNFα)، الجلوتاثيون المختزل(GSH) ، إنزيم سوبر أكسيد ديسميوتاز (SOD)) ، الدهون بالبلازما / الحصين (الكوليستيرول الكلي (TC) ، البروتين الدهني منخفض الكثافة(LDL) ، البروتين الدهني عالي الكثافة(HDL) ، ثلاثي الغليسريد (TG)) ، علامات الطوافة الدهنية (كافيولين 1 (CAV1) ، فلوتيللين ((FLOT1) ، علامات سلامة الحاجز الدموي الدماغي BBB (الألبومين(Albumin) ) ، علامات نظام الرنين أنجيوتنسن (الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1 (ACE1)، الانزيم المحول للأنجيوتنسن 2 ((ACE2)، علامات الاستماتة (الباكس (Bax)، تيبويلين (Tub)) ، وعلامات الاستروجين (مستقبلات الاستروجين ألفا ((ERα). بالإضافة إلى ذلك ، تم إرسال الثلاثة حصينات المتبقية من كل مجموعة إلى مختبر علم الأنسجة لتقييم الأنسجة المتدهورة والخلايا العصبية السليمة باستخدام الصبغة العادية (H&E) و صبغة Nissl ، في حين تم تقييم علامات الحمض البروتيني الليفي الدبقي الاستماتي (GFAP) باستخدام التحليل المناعي الكيميائي. كما تم تسجيل أوزان الفئران قبل البدء للتحليل السلوكي والكيميائي الحيوي والأنسجة المرضية.
ويمكن تلخيص نتائج الدراسة الحالية في الآتي :
تأثيرات إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز على علامات الحصين شملت الآتي :
• إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز أدى الى زيادة ملحوظة في أوزان الفئران وذلك بنهاية حث مرض ألزهايمر.
• إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز تسبب في تثبيط الذاكرة المكانية وغير المكانية والسلوك الاكتئابي المستحث في الفئران دون أي تأثير على النشاط الحركي.
• أظهر إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز علامات ملحوظة للتكون الأميلودي والتي تشمل الأميلودبيتا 1-42 ، بروتين قاطع الأميلويد موقع بيتا 1 ، أستيل كولين إستراز ، وبروتين التاو المفسفر بينما انخفضت مستويات إنزيم خفض فاعلية الأنسولين و النبريلايسين.
• أدى إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز الى زيادة علامات الاجهاد التأكسدي النيتروجيني والذي شمل أوكسيديز نيكوتيناميد الأدينين ثنائي نيوكليوتيد الفوسفات 1 ، ثنائى ألدهايد المالون ، الانزيم المستحث لتصنيع أكسيد النيتريك ، الانزيم العصبي لتصنيع أكسيد النيتريك ، وعامل النخر الورمي ألفا الالتهابي، بينما تسبب في تخفيض مستويات إنزيمات الدفاع المضادة للأكسدة والتي تشمل الجلوتاثيون المختزل و إنزيم سوبر أكسيد ديسميوتاز.
• أدى إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز الى زيادة ملحوظة في علامات دهون البلازما والحصين في الفئران حيث ارتفعت مستويات الكوليستيرول الكلي ، البروتين الدهني منخفض الكثافة ، و ثلاثي الغليسريد بينما نقصت مستويات البروتين الدهني عالي الكثافة في البلازما فقط. اضافة الى ذلك ، ارتفعت مستويات علامات الطوافة الدهنية الحصينية حيث زاد استحثاث الكافيولين 1 ومستويات الفلوتيللين 1.
• تم تعطيل سلامة الحاجز الدموي الدماغي عن طريق إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز حيث كان مستويات الألبومين مرتفعة بالحصين.
• كان محور الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1 / الانزيم المحول للأنجيوتنسن 2 كجزء من نظام الرنين أنجيوتنسن حاضرا بقوة في إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز حيث كان استحثاث الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1 مرتفعا بينما منخفضا للانزيم المحول للأنجيوتنسن 2.
• أظهر إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز ارتفاعا كبيرا في علامات الاستماتة والتي تشمل الباكس والتيوبيلوين.
• تم استحثاث مستقبلات الاستروجين ألفا بشكل كبير عن طريق إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز.
• أظهر إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز تلفا شديدا في بنية الحصين كما ظهر في صبغة H&E بالاضافة الى تقليل عدد الخلايا العصبية السليمة كما ظهر بواسطة صبغة Nissl. علاوة على ذلك تم زيادة الاستحثاث المناعي للحمض البروتيني الليفي الدبقي الاستماتي.
تأثيرات البريندوبريل و على تغييرات علامات الحصين المستحثة في الفئران عن طريق إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز شملت الآتي:
• قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بتقليل وزن الفئران في نهاية الحث وذلك بالمقارنة مع الفئران التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز.
• قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بالتحسين بشكل كبير من الذاكرة المكانية وغير المكانية والسلوك الاكتئابي في الفئران وذلك بالمقارنة مع الفئران التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز وذلك دون أي تأثير على النشاط الحركي.
• قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بالتقليل بشكل محلوظ من الأميلودبيتا 1-42 ، بروتين قاطع الأميلويد موقع بيتا 1 ، أستيل كولين إستراز ، وبروتين التاو المفسفر بينما زادوا مستويات إنزيم خفض فاعلية الأنسولين و النبريلايسين.
• تسبب البريندوبريل والسيمفاستاتين بنقصان ملحوظ في علامات الاجهاد التأكسدي النيتروجيني والذي شمل أوكسيديز نيكوتيناميد الأدينين ثنائي نيوكليوتيد الفوسفات 1 ، ثنائى ألدهايد المالون ، الانزيم المستحث لتصنيع أكسيد النيتريك ، الانزيم العصبي لتصنيع أكسيد النيتريك ، وعامل النخر الورمي ألفا الالتهابي، بينما تسببا في زيادة مستويات إنزيمات الدفاع المضادة للأكسدة والتي تشمل الجلوتاثيون المختزل و إنزيم سوبر أكسيد ديسميوتاز وذلك مقارنة بالفئران التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز.
• كانت مستويات علامات الدهون بالبلازما والحصين منخفضة بشكل ملحوظ في الفئران التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز وذلك بعد معالجتهم بالبيرنودبريل أو السيمفاستاتين حيث انخفضت مستويات الكوليستيرول الكلي ، البروتين الدهني منخفض الكثافة ، و ثلاثي الغليسريد بينما ارتفعت مستويات البروتين الدهني عالي الكثافة في البلازما فقط. اضافة الى ذلك ، قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بعكس مستويات علامات الطوافة الدهنية الحصينية المتغيرة حيث انخفض استحثاث الكافيولين 1 ومستويات الفلوتيللين 1.
• تم استعادة سلامة الحاجز الدموي الدماغي المدمر بسبب إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز وذلك بشكل ملحوظة بعد العلاج بالبريندوبريل أو السيمفاستاتين حيث قاما بخفض مستويات الأبومين في الحصين.
• قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بخفض استحثاث الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1 وزيادة استحثاث الانزيم المحول للأنجيوتنسن 2.
• قام البريندوبريل والسيمفاستاتين بخفض ملحوظ لعلامات الاستماتة والتي تشمل الباكس والتيبويولين.
• تم أيضا خفض استحثاث مستقبلات الاستروجين ألفا وذلك بعد علاج الفئران التي تعرضت تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز بالبريندوبريل أو السيمفاستتاتين.
• قلل البريندوبريل والسيمفاستاتين الضرر الناجم في بنية الحصين بسبب إزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز بالاضافة الى زيادة الخلايا العصبية السليمة. علاوة على ذلك ذلك قاما بخفض الاستحثاث المناعي للحمض البروتيني الليفي الدبقي الاستماتي.
طبقا للبيانات السابقة يمكن استنتاج الآتي:
1- أظهر عقاري البريندوبريل والسيمفاستاتين آليات متعددة ومرتبطة وذلك في تحسين مرض ألزهايمر المحاكى في فئران التجارب التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز.
2- البريندوبريل والسيمفاستاتين يلقيا نظرة ثاقبة على هذا التداخل الجديد بمحور ارتفاع شحوم الدم-الطوافات الدهنية/ الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1/الانزيم المحول للأنجيوتنسن 2 والتكون الأميلودي بالاضافة الى خصائصهما المضادة للأكسدة والالتهاب.
3- قام كلا من البريندوبريل والسيمفاستاتين بخفض مستوى الدهون العالي ، تنظيم اشارات البروتينات الدهنية الغير منتظمة ، خفض استحثاث الانزيم المحول للأنجيوتنسن 1 ، زيادة استحثاث مسارات الانزيم المحول للأنجيوتنسن 2 - النبريلايسن- إنزيم خفض فاعلية الأنسولين و خفض استحثاث بروتين قاطع الأميلويد موقع بيتا 1.
4- كنتيجة لكل ذلك قاما بخفض ترسيب الأميلودبيتا 1-42 و برتين التاو المفسفر بالحصين بالاضافة الى زيادة الانتقال الكوليني الحصيني.
5- البريندوبريل والسيمفاستاتين أظهرا أيضا صفات مضادة للاستماتة حيث قللا من عدد الخلايا العصبية المتآكلة وذلك أثناء الفحص النسيجي المرضي وأخيرا تحسين ضعف الإدراك ووظيفة الذاكرة بالإضافة إلى تقليل البوادر الاكتئابية في الفئران التي تعرضت لإزالة المبايض جراحيا / حقن د-جالاكتوز/ تغذية عالية الدهون عالية الفركتوز.