الفهرس 
AcknowledgmentOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 133 |  |  |
| | | from | 133 | | |
Abstract
The present study was conducted on 491 small ruminants (281 sheep and 210 goats) were randomly selected During the period of investigation, September 2017- May 2019, from Alghreizat Village, El-Maraghah-City, Sohag Governorate, and clinically examined for detection of the clinical lesions of pseudotuberculosis. Of the examined animals, 155 (145 sheep and 10 goats) were found with clinical signs of pseudotuberculosis 98 of them had closed lesions (92 in sheep and 6 in goats). A total of 56 pus samples were collected from them (53 from sheep and 3 from goats) and subjected to bacteriological examination with culture media and Gram’s stain, confirmed with biochemical tests (catalase, urease and glucose fermentation), reverse CAMP test and molecular diagnosis (PCR).
Infected sheep and goats showed various signs of pseudotuberculosis through clinical examination and L.N palpation. In sheep, the lesions showed variation in diameter, it were 3 cm up to 13 cm, its content consistency was soft, doughy and solid caseated with yellowish to greenish pus. The wool over lesions was lost except in few cases and some animals showed systemic reaction. In goats, milder signs were observed, the lesions as general were smaller in diameter compared with sheep, content of lesions were usually white milky to white creamy, hair over the lesion was lost. There was no effect on general condition and no disorders were observed. Parotid lesions were the most common in both species (60%) followed by prescapular, mandibular, prefemoral, popliteal, both supramammary and superficial inguinal showed 14.84%, 12.26%, 5.16%, 3.87%, and 1.97% respectively. In sheep, the prescapular and the mandibular lesions represented 13.10% followed by prefemoral, popliteal, both supramammary and superficial inguinal showed 5.52%, 4.14% and 2.07 respectively, while in goats, the prescapular lesions represented 40% only. Pseudotuberculosis lesions appeared as single, double and multiple lesions 53.55%, 31.61% and 14.84% respectively (in sheep were 51.03%, 33.10% and 15.86% respectively, while in goats were 90%, 10% and 0% respectively). These lesions sited unilateral and bilateral 74.84% and 25.16% respectively (in sheep were 73.10% and 26.90% respectively, while in goats were 100% and 0% respectively). Closed lesions were seen in 63.23% (63.45% in sheep and 60% in goats) while 36.77% (36.55% in sheep and 40% in goats) had opened lesions.
Through the postmortem inspection of ten cases (seven sheep and three goats) slaughtered during Eid al-Adha, there were enlargement in parotid, prescapular and prefemoral lymph nodes. Visceral lesions were observed in three sheep cases that showed enlargement in internal lymph nodes as mediastinal L.N. and multiple hepatic abscesses. Incision of the affected lymph nodes in sheep revealed thick whitish to greenish caseated purulent material with offensive odor, surrounded by thick fibrous wall (onion like appearance) which was not observed in goats.
Of 56 pus samples inoculated onto culture media, 38 appeared as creamy yellowish white colonies with and without minute zones of β-hemolysis on blood agar media and blackish colonies with glistening surfaces on Cysteine tellurite blood agar media. Gram’s staining of the colonies revealed arranged Gram positive pleomorphic rods bacteria under microscope. The isolates (38) were subjected to catalase test, urease test, glucose fermentation test and reverse CAMP test, where 30 isolates were positive and eight isolates were negative. The overall bacteriological examination and confirmatory tests revealed that 53.57% (30 of 56) were positive to C. pseudotuberculosis and 46.43% (26 of 56) were negative.
Conventional PCR technique was applied on DNA extract of 15 isolates (two bacteriologically and biochemically positive isolates and 13 bacteriologically and biochemically negative isolates), the specific band showed at 816bp {Specific to 16SrRNA gene of C. pseudotuberculosis} after PCR amplification revealed that 46.67% (7 of 15) were positive to C. pseudotuberculosis and 53.33% (8 of 15) were negative.
The overall prevalence of C. pseudotuberculosis infection in small ruminants through clinical examination was 31.57 % (155 of 491). The prevalence of C. pseudotuberculosis infection was 51.60 % (145 of 281) in sheep and 4.76 % (10 of 210) in goats. In general, the animals aged from 2-3 years old had higher with infection rate (42.96 %) than animals aged from 4-5 years, above 5 years, 1-2 years, 3-4 years, less than 6 months and 6 months- 1 year, which were 33.33 % ,33.33 % ,30.88 %, 27.55%, 23.08% and 20.27 % respectively. Sheep aged from 2-3 years old had higher with infection rate (77.78 %) than sheep aged from 6 months- 1 year, 1-2 years, 4-5 years, 3-4 years and sheep less than 6 months old, which were 48.28 %, 47.37 %, 43.75 %, 41.54 % and 36.67 % respectively, while the least were sheep aged above 5 years old (33.33%). Goats aged from 1-2 years old had higher with infection rate (10%) than goats aged from 2-3 years old and goat less than 6 months old, which were 7.14 % and 4.55 % respectively, while the least were goats aged from 6 months – 1 year old (2.22%). Goats aged above 3 years old has no infection recorded. Males (42.64%) had higher infection rate than females (27.62%) for C. pseudotuberculosis as 69.44% in male sheep, 8.77% in male goats, 45.45% in female sheep and 3.27% in female goats. The prevalence of C. pseudotuberculosis infection in hot months (April till September) (38.57%) was higher than non-hot months (October till March) (21.21%). Sheep in south region had higher infection rate (56.17%) than in North and East regions (50.65% and 35.71% respectively), while goats in North region had higher infection rate (6%) than in South and East regions (4.42% and 3.70% respectively).
The C. pseudotuberculosis was resistant to Penicillin, Tetracycline, Sulphametaxazol/Trimethoprim, Neomycin, Lincomycin and Doxycycline. It was moderately sensitive to Ampicillin, Florfenicol, Gentamicin, Amoxicillin/Clavulanic acid and Ciprofloxacin, Highly sensitive to Cefquinome, which considered the drug of choice in this study. After three weeks application of the therapeutic protocol for C. pseudotuberculosis infection in sheep that included: Cobactan 2.5%®, Metacam®, Alpha chymotrypsin® and AD₃E®, the signs of resolution appeared through decrease in the diameter of lymph nodes, and the animal condition improved. Despite, even after curance, it was observed that infection repeated within six months.
أجريت الدراسة الحالية على 491 من المجترات الصغيرة (281 من الاغنام و 210 من الماعز) والتي تم اختيارها عشوائياً خلال الفترة من سبتمبر 2017 وحتي مايو 2019 من قرية الغريزات ، مدينة المراغة ، محافظة سوهاج. وتم فحصها إكلينيكياً للكشف عن وجود حالات إصابة لمرض السل الكاذب بها. ومن بين الحيوانات التي تم فحصها ، تم العثور على 155 حيوان (145 أغنام و 10 ماعز) تظهر عليهم العلامات السريرية لمرض السل الكاذب، 98 منهم مصابة بآفات مغلقة (92 في الأغنام و 6 في الماعز) تم جمع 56 عينة صديد منها (53 من الأغنام و 3 من الماعز) وتم إخضاعها للتشخيص البكتريولوجي بوسائل الاستزراع وصبغة الجرام ، وتم التأكد من ذلك بالإختبارات الكيميائية الحيوية (الكاتلاز واليورياز وتخمير الجلوكوز) ، اختبار الكامب العكسي والتشخيص الجزيئي (تقنية تفاعل البلمرة).
أظهرت الأغنام والماعز المصابة علامات مختلفة لمرض السل الكاذب من خلال الفحص السريري وفحص الغدد الليمفاوية.ففي الأغنام ، أظهرت الآفات تباينًا في القطر ، حيث تراوحت بين 3 سم و 13 سم ، وكان قوامها طريا وعجينًا وصلبًا مع صديد أصفر إلى أخضر. تم فقدان الصوف فوق الآفات إلا في حالات قليلة مع وجود بعض التأثيرات في الحالة العامة للحيوان .كما لوحظت علامات أكثر اعتدالا في الماعز ، وكانت الآفات بشكل عام أصغر في القطر مقارنة مع الأغنام ، وكان محتوى الآفات عادة أبيض حليبي إلى أبيض كريمي ، وفقد الشعر فوق الآفة. لم يكن هناك أي تأثير على الحالة العامة ولم يلاحظ أي اضطرابات. كانت الآفات بالغدة النكفية هي الأكثر شيوعاً في كلا من الاغنام والماعزبنسبة 60٪ تليها الآفات بالغدة قبل الكتف ، والغدة الفكية السفلية ، والغدة قبل الفخذ، و الغدة المأبضية ، والأربية السطحية والفوق ثديية بنسبة 14.84٪ ، 12.26٪ ، 5.16٪ ، 3.87٪ ، 1.97٪ على التوالي. في الأغنام ، الآفات بالغدة أمام الكتف والغدة الفكية السفلية تمثل 13.10٪ تليها الآفات بالغدة قبل الفخذ، المأبضية ، فوق الثديية والسطحية الأربية بنسبة 5.52٪ ، 4.14٪ و 2.07 على التوالي ، بينما في الماعز ، الآفات بالغدة قبل الكتف تمثل 40٪ فقط. وظهرت آفات السل الكاذب على شكل آفات مفردة ومزدوجة ومتعددة بنسبة 53.55٪ و 31.61٪ و 14.84٪ على التوالي (في الأغنام 51.03٪ و 33.10٪ و 15.86٪ على التوالي ، بينما في الماعز 90٪ و 10٪ و 0٪ على التوالي). كما كانت هذه الآفات منفردة وثنائية الجانب بنسبة 74.84٪ و 25.16٪ على التوالي (في الضأن 73.10٪ و 26.90٪ على التوالي ، بينما في الماعز كانت 100٪ و 0٪ على التوالي). وشوهدت الآفات المغلقة في 63.23٪ (63.45٪ في الضأن و 60٪ في الماعز) بينما 36.77٪ (36.55٪ في الضأن و 40٪ في الماعز) كانت بها آفات مفتوحة.
ومن خلال فحص ما بعد الذبح لعشر حالات (سبع أغنام وثلاث ماعز) تم ذبحها خلال عيد الأضحى ، كان هناك تضخم في الغدد الليمفاوية النكفية ، والغدد الليمفاوية قبل الكتف وقبل الفخذ. ولوحظت آفات حشوية في ثلاث حالات من الأغنام التي أظهرت تضخمًا في الغدد الليمفاوية الداخلية وخراجات كبدية متعددة. تحتوي في الأغنام علي مادة قيحية كثيفة بيضاء إلى مخضرة ذات رائحة كريهة ، محاطة بجدار ليفي سميك متعدد الطبقات (يشبه البصل) والتي لم تلاحظ في الماعز.
من بين 56 عينة صديد تم زرعها علي أوساط الإستزراع ، ظهرت 38 عينة علي هيئة مستعمرات بيضاء مصفرة كريمية مع وبدون إنحلال الدم على وسط أجار الدم والمستعمرات السوداء ذات الأسطح اللامعة على وسط أجار الدم السيستين، كما ظهرت بكتيريا عصوية متعددة الأشكال موجبة الجرام تحت المجهر. تم اخضاع العزلات (38) لاختبار الكاتلاز واليورياز واختبار تخمير الجلوكوز واختبار الكامب العكسي حيث كانت 30 عزلة إيجابية وثمانية عزلات سلبية. وأظهر الفحص البكتريولوجي الشامل والإختبارات التأكيدية أن 53.57٪ (30 من 56) كانت إيجابية لمرض السل الكاذب و 46.43٪ (26 من 56) كانت سلبية.
تم تطبيق تقنية تفاعل البلمرة على مستخلص الحمض النووي لـ 15 معزولة (عزلتان إيجابيتان من الناحية البكتريولوجية والكيميائية الحيوية و 13 عزلة سلبية من الناحية البكتريولوجية والكيميائية الحيوية) ، وأظهر النطاق المحدد عند 816 نقطة أساس (خاص بجين الجزء 16 للحمض النووي الريبوسومي) حيث أظهرت النتائج أن 46.67٪ (7 من 15) كانت موجبة لمرض السل الكاذب وأن 53.33٪ (8 من 15) كانت سلبية.
وأوضحت النتائج أن معدل إنتشار عدوى السل الكاذب في المجترات الصغيرة من خلال الفحص السريري 31.57٪ (155 من 491) 51.60٪ (145 من 281) في الأغنام و 4.76٪ (10 من 210) في الماعز. وبشكل عام ، الحيوانات التي تتراوح أعمارها بين 2-3 سنوات كان لديها معدل إصابة أعلى (42.96٪) من الحيوانات التي تتراوح أعمارها بين 4-5 سنوات ، فوق 5 سنوات ، 1-2 سنوات ، 3-4 سنوات ، أقل من 6 أشهر و 6 شهور - 1 سنة والتي كانت 33.33٪ ، 33.33٪ ، 30.88٪ ، 27.55٪ ، 23.08٪ و 20.27٪ على التوالي. الأغنام التي تتراوح أعمارها بين 2-3 سنوات كانت لديها نسبة إصابة أعلى (77.78٪) من الأغنام التي تتراوح أعمارها من 6 أشهر إلى سنة ، 1-2 سنة ، 4-5 سنوات ، 3-4 سنوات والأغنام أقل من 6 أشهر ، والتي كانت 48.28٪ ، 47.37٪ ، 43.75٪ ، 41.54٪ ، 36.67٪ على التوالي ، بينما أقلها كانت الأغنام التي تزيد أعمارها عن 5 سنوات (33.33٪). كانت الماعز التي تتراوح أعمارها بين 1-2 سنة أعلى بنسبة إصابة (10٪) من الماعز بعمر 2-3 سنوات والماعز أقل من 6 أشهر والتي كانت 7.14٪ و 4.55٪ على التوالي ، بينما أقلها كانت الماعز بعمر من 6 شهور - 1 سنة (2.22٪). الماعز فوق سن 3 سنوات لم تسجل أي إصابة. كانت نسبة الإصابة في الذكور (42.64٪) أعلى من الإناث (27.62٪) لمرض السل الكاذب حيث بلغت 69.44٪ في ذكور الأغنام و 8.77٪ في ذكور الماعز و 45.45٪ في إناث الأغنام و 3.27٪ في إناث الماعز. كان انتشار عدوى السل الكاذب في الأشهر الحارة (من أبريل وحتى سبتمبر) (38.57٪) أعلى من الأشهر غير الحارة (من أكتوبر وحتى مارس) (21.21٪). كان معدل الإصابة بالأغنام في المنطقة الجنوبية أعلى (56.17٪) منه في المناطق الشمالية والشرقية (50.65٪ و 35.71٪ على التوالي) ، بينما سجلت الماعز في المنطقة الشمالية نسبة إصابة أعلى (6٪) منها في المنطقة الجنوبية والشرقية (4.42٪ و 3.70٪ على التوالي).
وبتطبيق اختبار الحساسية للمضادات الحيوية ظهر السل الكاذب مقاومًا للبنسلين والتتراسيكلين والسلفاميتاكسازول / تريميثوبريم والنيومايسين واللينكومايسين والدوكسيسيكلين. و حساس بشكل معتدل للأمبيسيلين والفلورفينيكول والجنتاميسين والأموكسيسيلين/حمض كلافولانيك وسيبروفلوكساسين، وشديد الحساسية للسيفكوينوم والذي اعتبر الدواء المفضل في هذه الدراسة. وبعد ثلاثة أسابيع من تطبيق البروتوكول العلاجي لعدوى السل الكاذب في الأغنام الذي تضمن: كوبكتان 2.5% - ميتاكام – الفا كيموتريبسين- أد3هـ ، وظهرت علامات الشفاء من خلال انخفاض قطر العقد الليمفاوية وتحسنت حالة الحيوان، وعلي الرغم من ذلك وحتى بعد الشفاء لوحظ أن العدوى تتكرر في غضون ستة أشهر.