الفهرس 
STEM CELLSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 136 |  |  |
| | | from | 136 | | |
Abstract
في السنوات الأخیرة تزايد الاھتمامبقضایا الخصوبة المتعلقة بمعالجة السرطان بما في ذلك الجراحة والعلاج الإشعاعي والعلاج الكیمیائي ، حیثیمكن أن یكونلھاتأثیر مدمر مؤقت أو دائم على خصوبة الرجال.
من المعروف
أن العلاج الكیمیائي للسرطان یمكن أن ینتجعنھ آثار ضارة في العدید من الأعضاء. یعد تلف الخصیة أحد أخطر آثار العلاج الكیمیائي ، حیث أن الخصیة ھي من بین الأنسجة الطبیعیة غیرالمستھدفة التي تتعرض للھجوم بسبب نشاطھا العالي في التكاثر وترتبط باضطرابات قلة السائل المنوي والعقم.یمكن أن یظھر الأطفال والشباب الذین تعرضوا للعلاج الكیمیائي في مرحلة ما قبل البلوغ ضعف لا رجعة فیھا او فقدًا لحاله الخصوبه.
تم تنفیذھذا العمل لإظھارإمكانیة تمایزالخلایا الجذعیة المحفزة الي خلایا تناسليه ذكریة في الجسم الحي ، بدیل آخر ممكن لعلاج العقم عند الذكور.
أجریت ھذه الدراسة في علم الأمراض السریري والكیمیائي والمعمل المركزي لمستشفیات جامعة بنھا في الفتره من شهر يناير 2020 الي شهر يوليو 2020.
تم إجراء تمايز في المختبر للخلايا الجذعيه المستحثه متعدده القدرات إلى خلايا ذكريه تناسليه . تم الحصول على الخلايا الجذعيه المستحثه متعدده القدرات من خلال تمايز الخلايا الليفية ثم تحويلها إلى جسم جنيني.
ثم بعد أسبوع نضيف (حمض الريتينويك) لمدة يومين.
لدينا ثلاث مجموعات::
المجموعة الأولى هي الجسم الجنيني في اليوم صفر ، المجموعة الثانية هي الجسم الجنيني بعد أسبوع واحد و المجموعة الثالثة هي الجسم الجنيني بعد اضافه حمض الريتينويك.
أولاً ، تم تأكيد الأنماط الظاهرية للخلايا الجذعية بواسطة قياس التدفق الخلوي كشفت أن الخلايا الجذعيه المستحثه متعدده القدرات عبرت عن SSEA1 و c Kit و CD90 مما يشير إلى أن خلايا الخلايا الليفية يمكن أن تتمايز إلى خلايا. جذعيه مستحثه متعدده القدرات .
ثم تمت مقارنة مجموعاتنا الثلاث على المستوى الجزيئي. علامات RT PCR المستخدمة هي OCT4 ، VASA ، SSEA1 ، STRA8 أظهرت نتائج RT-PCR أن:
تم زيادة التعبير عن جين OCT4) في المجموعة الأولى ، ولكن بعد إضافة RA ، انخفض التعبير عن OCT4 في المجموعة الثانية والثالثة
انخفض التعبير الجيني VASA في المجموعة الأولى وزاد بعد إضافة RA في الثانية والثالثة .
زاد التعبير عن جين SSEA1 في المجموعة الأولى وانخفض بعد RA في المجموعتين الثانية والثالثة .
انخفض التعبير عن جين STRA8 الجين المستهدف لـ RAفي المجموعة الأولى وزاد بعد إضافة RA في المجموعتين الثانية والثالثة
لذلك وجدنا أن نسخ Stra8 قد تم تنظيمه بشكل كبير بواسطة حمض الريتينويك في الاجسام الجنينيه المشتقة من الخلايا الجذعيهالمستحثه مقارنة بالخلايا التي لم تتعرض لـحمض الريتينويك . ثانيًا ، تم تحفيز الاجسام الجنينيه المشتقة من الخلايا الجذعيهالمستحثهالمتعده القدرات بواسطة حمض الريتينويك للتمييز إلى PGCs و SSCs ، كما يتضح من تعبيرها عن SSEA1 و VASA و STRA8. أظهرت الدراسات السابقة أن VASA (المعروف أيضًا باسم Mvh) هو علامة محددة للتمييز بين الخلاياالتناسليه من مرحلة الهجرة المتأخرة إلى مرحلة ما بعد الانتصافي ، وتعتبر VASA العلامة الأكثر موثوقية لتمايز الخلايا التناسليه عن الخلايا الجذعية.
أظهر العمل السابق أن اضافه حمض الريتينويك يمكن أن يتسبب بسرعة في تمايز IPS إلى خلايا ذكورية تناسليه .
أخيرًا تم إجراء تقنية اللطخة الغربية: النشاف الغربي هو تقنية شائعة للكشف عن بروتينات معينة وتفعيل مسارات الإشارات في الأنسجة أو الخلايا
تحليل اللطخة الغربية لتعبير OCT4 و STRA8 و VASA و SSEA1 في الأجسام الجنينية المشتقة من miPSCs. محلول البروتين من miPSCs في الأيام 0 و 3 و 7 وبعد إضافة حمض الريتينويكتم تجفيفها وتلطيخها بالأجسام المضادة. β ‐ Actin بمثابة ضابط داخلي
مستويات التعبير النسبي لأربعة بروتينات (OCT4 و STRA8 و VASA و SSEA1).
قبل إضافةحمض الريتينويكOCT4 تمت زيادة تعبيره ، ولكن بعد إضافة حمض الريتينويك زاد تعبير VASA وSTRA8
خاتمة
أظهر العمل السابق أن اضافه حمض الريتينويك يمكن أن يتسبب بسرعة في تمايز IPS إلى خلايا ذكورية تناسليه.