الفهرس 
AbstractOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 96 |  |  |
| | | from | 96 | | |
Abstract
يعتبر مرض الجلد العقدي أحد أهم الأمراض الفيروسية العابرة للحدود التي تصيب الابقار من الناحية الاقتصادية. أول ظهور لمرض الجلد العقدى في الأبقار المصرية كان في صيف 1989 بمحافظة السويس والإسماعيلية ، تلاه تفشي المرض في العديد من المحافظات المصرية بما في ذلك المنوفية ، لذلك هدفت الدراسة الحالية إلى التحقق من الطابع الوراثي للفيروس في محافظة المنوفية في الفترة من صيف 2018 إلى. صيف 2020 وتحديد العلاقة الجينية بينه وبين السلالات الحقلية الاخرى وسلالة اللقاح.
وقد تضمنت الدراسة الحالية ما يلي:
تم تجميع100 عينه من الابقار المصابة ظاهريا على النحو التالي؛ 40 عينة عقدة جلدية 50 عينة دم على مانع تجلط و10عينات البان.
جميع العينات التي تم جمعها خضعت لاختبار البلمرة المتسلسل التقليدي الذي يستهدف جين GPCR لتأكيد وجود المرض واظهرت نتائج الاختبار الاتى
من إجمالي100عينة تم فحصها ، تم اختبار 70 عينة إيجابية للفيروس ؛ جميع العقد الجلدية كانت ايجابيه (40 عينه) وفقط 26 من اصل 50 و 4 من أصل 10 عينات كانت ايجابية للدم الالبان على التوالي.
تم عمل التسلسل الجينى باستخدام جين GPCR لثماني (سبع للبحث الاول منشور و1 للبحث الثانى منشور) عينات إيجابية لاختبار البلمرة المتسلسل تم اختيارها عشوائيًا من العقد الجلدية واالدم والالبان وتمثل الفترة من 2018 إلى 2020 جنبًا إلى جنب مع سلالة اللقاح المستخدم حاليًا في مصر (سيرفاك). وتم اختيار عينه عقدية واحدة (للبحث الثانى منشور) من هذة العينات لسنه 2020 وايضا عينة اللقاح لعمل التسلسل الجينى باسخدام اثنين من الجينات الأخرى ORF095 و ORF103.و تم إنشاء تحليل التسلسل وشجرة النشوء والتطور.
كشفت شجرة النشوء والتطور أن سلالة الفيروس من محافظة المنوفية مجمعة مع سلالات برية أخرى من مصر ودول أفريقية والشرق الاوسط في نفس المجموعة من الشجرة ومنفصلة عن السلالات التطعيمية بما فيها لقاح سيرفاك المصرى والتى تقع جميعها فى مجموعة منفصلة على الشجرة
اظهر تحليل التسلسل المقارن لفيروسات محافظة المنوفية نسبة عالية من التماثل تتراوح من 99 ٪ إلى 100٪ فيما بينها وبين السلالات البرية الأخرى من مناطق جغرافية مختلفة بما في ذلك تلك المعزولة سابقًا من مصر والتي تُظهر اختلافات قليلة أو معدومة بينهما.
من ناحية أخرى ، كانت النسبة المئوية للتماثل بين سلالات المنوفية وسلالة اللقاح المصرى سيرفاك لجين GPCR ، و 98٪ لجين ORF095 و 97٪ لجين ORF103كما اظهرت والأحماض الأمينية المستخلصة استبدال خمسة ، اثنين وثمانية أحماض أمينية لـ GPCR ، ORF095 و ORF103 على التوالي وهناك حذف اربعة احماض امينيه في جين GPCR لسلالة المنوفية ومثل هذا الحذف غير موجود في سلالة لقاح سيرفاك.
تم إجراء تجربة لعزل فيروس الجلد العقدى على الغشاء المشيمى للبيض المخصب وخلايا MDBK باستخدام 10 عينات عقد جلديه غير السابقة والمجمعة من تفشى المرض لعام 2020. واظهرت النتايج ان فقط من أصل عشر عينات ، تظهر 4 عينات pock lesions على الغشاء المشيمى للبيض و 6 من أصل عشر عينات اظهرت CPE مميزة على خلايا MDBK. وتعرض الغشاء المشيمى المصاب كذلك للفحص المجهري الإلكتروني الذي يؤكد وجود فيرون بشكل بيضاوي الشكل ، مع نهايات مستديرة ومظهر كروي مميز.
بعد الانتهاء من ثلاثة تمريرات على الخلايا MDBK و CAM تم إخضاع كل منهما وكذلك العينات الأصلية إلى اختبار البلمرة المتسلسل حقيقى و أظهرت النتائج أن قيم Ct للممرات أعلى من تلك الخاصة بالعينات العقدية الأصلية مما يشير إلى أن التركيز الفيروسي انخفض بعد ثلاثة تمريرات على خلايا MDBK و CAM.