الفهرس 
CONTENTSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 101 |  |  |
| | | from | 101 | | |
Abstract
تهدف هذه الدراسة الى عزل و دراسة التوصيف البكتيري و الجزيئي لبكتريا الباسيلس سيريس وذلك لدراسة مدى انتشارها في محافظة الغربية, مصر. و دراسة تأثير المستحلب النانوي لحبة البركة و الزعتر و جسيمات أكسيد الزنك النانوية المحضرة بطريقة صديقة للبيئة وهي الطريقة البيولوجية بإستخدام طحلب سبيرولينا بلاتنسيس على عزلات الباسيلس سيريس.
فتم جمع 125 عينة عشوائية من منتجات لحوم (لانشون و سجق) ومنتجات ألبان ( جبنة رومي و جبنة قريش و أرز بلبن), 25 عينة لكل منها من المحلات التجارية و الأسواق المختلفة بمحافظة الغربية خلال الفترة من شهر مارس الى يوليو 2022م, و تم أخذ كل عينة (25 جرام) على حدة في أكياس بلاستيكية معقمة ونقلها مباشرة في صندوق حافظ الى معمل معهد بحوث الصحة الحيوانية, فرع طنطا.
تم عزل الباسيلس سيريس من العينات باستخدام 0.1 % ببتون كمنشط متبوعا بالعزل على أطباق أجارPEMPA و .MYP ثم عمل اختبار حركية العزلات و تم تشخيصها شكليا بواسطة صبغة جرام و بيوكيميائيا بالإختبارات الآتيةindole, methyl red, Voges-Proskauer, citrate utilization, urease, catalase, oxidase, nitrate reduction, gelatin hydrolysis. وتم الكشف عن إنزيمات الضراوةlecithinase, amylase proteolytic, lipolytic activities, haemolytic, لعزلات الباسيلس سيريس. كما تم فحص عزلات الباسيلس سيريس لقدرتها على إنتاج الأغشية الحيوية. كما تم أيضا التحديد الوراثي لعزلات الباسيلس سيريس والكشف عن بعض جينات الضراوة باستخدام تقنية تفاعل البوليميريز المتسلسل. و تم اجراء اختبار الحساسية للمضادات الحيوية على عشرين من عزلات الباسيلس سيريس لدراسة مقاومتها أو حساسيتها لاثنى عشر نوعا من المضادات الحيوية.
فكانت عزلات الباسيلس سيريس سالبة للمانيتول و تحلل الليسيثين و قد نمت بشكل جيد و أنتجت مستعمرات زرقاء مميزة باللون الفيروزي وبلغ قطرها حوالي 5 مم و محاطة بمنطقة ترسيب صفار البيض من نفس اللون على طبق أجار PEMPA. وأنتجت مستعمرات وردية بيضاء محاطة بمنطقة ترسيب بيضاء على طبق أجار MYP. تم أخذ المستعمرات الايجابية المشتبه بها وحفظها في أجار مغذي شبه صلب, ثم تم تحضينها عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة لعمل المزيد من الفحوصات. وكانت جميع عزلات الباسيلس سيريس متحركة و موجبة الجرام و عصوية الشكل. و أظهرت نتائج الإختبارات البيوكيميائية للسلالات المعزولة أن لها جميع الخصائص البيوكيميائية المميزة للباسيلس سيريس. و كانت عزلات الباسيلس سيريس شديدة الضراوة حيث احتوت علىlecithinase, amylase proteolytic, lipolytic activities,. وكذلك قدرتها على إنتاج الأغشية الحيوية.
وقد أظهرالفحص البكتريولوجي للعينات المجمعة أنه تم الحصول على 40 عزلة من الباسيلس سيريس من 125 عينة بنسبة 32% تم عزلها في الغالب من عينات الجبنة الرومي 14/25 بنسبة 56 % تليها اللانشون 11/25 بنسبة 44 % ثم الأرز بلبن 8/25 بنسبة 32 % ثم من السجق 7/25 بنسبة 28 % ولم يتم عزل بكتريا الباسيلس سيريس من عينات الجبنة القريش.
و لقد أوضحت نتائج اختبارات تفاعل البلمرة المتسلسل لخمسة عزلات عشوائية من الباسيلس سيريس المختبرة إحتوائهم على جين groEL ( الجين التشخيصي و التطوري لبكتريا الباسيلس سيريس) في العزلات الخمس (100%) ووجدت جينات الضراوة nhe و cytK المسببة للإسهال في العزلات الخمس (100%) بينما وجد جين ces المسبب للقيء في ثلاث عزلات فقط (60%) ولم يتواجد جين hbl المسبب أيضا للإسهال في أي من العزلات (0%).
كما أظهرت نتائج اختبارات الحساسية لعزلات الباسيلس سيريس (عدد 20) أن السيبروفلوكساسين و النورفلوكساسين و الليفوفلوكساسين كانوا أكثر تأثيرا على العزلات بنسبة 100% يليه الجينتاميسين بنسبة 80% ثم الدوكسيسيكلين بنسبة 60% ثم الكلورومفينيكول بنسبة 50% ثم الاريثرومايسين بنسبة 30% ثم الكلينداميسين بنسبة 20%, كما أظهرت المعزولات مقاومة كاملة للأمبيسيلين و السيفيبيم و الأزيترونام و الأموكسيسيلين- حمض الكلافيولانيك.
و تم تحضير المستحلب النانوي لحبة البركة و الزعتر و جسيمات أكسيد الزنك النانوية المستخلصة من نبات سبيرولينا بلاتنسيس في وحدة النانو بمركز بحوث صحة الحيوان بالدقي - جيزة - مصر. و تم توصيف الجسيمات النانوية بواسطة المجهر الالكتروني الماسح (SEM) بكلية الزراعة جامعة القاهرة و جهاز تفكك الضوء الديناميكي ((DLS بوحدة النانو بمعهد بحوث صحة الحيوان بالدقي للتحقق من خصائصها و حجمها والتي كشفت أن حجم الجسيمات كان ضمن الحجم النانوي.
كانت جسيمات حبة البركة النانوية مكعبة الشكل وكان حجمها 87.5 نانو متر, وكان توزيعها0.456 و شحنتها الكهربائية +15.9 Mv و اللزوجة 0.877 cpو التوصيل في مستحلب النانو 58 uS/cm. أما جسيمات الزعتر النانوية بلغ حجمها 142.8 نانو متر, وكان توزيعها 0.0891 و شحنتها الكهربائية +10.2 mV و اللزوجة 0.959 cp و التوصيل في مستحلب النانو 6 uS/cm. أما جسيمات أكسيد الزنك النانوية كانت شكل المعين و حجمها 67.8 نانو متر, وكان توزيعها0.2484 و شحنتها الكهربائية-21.8 mV و اللزوجة 0.925 cp و التوصيل في مستحلب النانو269 uS/cm.
تم تحديد تأثير الجسيمات النانوية على عزلات الباسيلس سيريس بإستخدام طريقة التخفيف لتحديد الحد الأدنى منها القادر على تثبيط نمو الميكروب ((MIC وأظهرت نتيجته أن جسيمات حبة البركة النانوية سببت تثبيطا طفيفا بتركيز 30% , بينما جسيمات أكسيد الزنك النانوية ثبطت نمو ميكروب الباسيلس سيريس عند تركيز 1.25 ملليجم/ مل. بينما لم تظهر جسيمات الزعتر النانوية اي تأثيرا مثبطا لنمو الباسيلس سيريس.
تم وصف الخصائص الشكلية و التغيرات في الخلايا البكتيرية لعزلات الباسيلس سيريس قبل وبعد العلاج بالجسيمات النانوية بواسطة المجهر الالكتروني الماسح (SEM) فأظهرت النتائج تأثير مثبط لجسيمات أكسيد الزنك النانوية مقارنة بجسيمات حبة البركة النانوية على نمو الباسيلس سيريس مع تدمير واضح في بنيتها.