الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 144 |  |  |
| | | from | 144 | | |
Abstract
نظرا لما تحدثه الآفات الحشرية الثاقبة الماصة وخاصة الذباب الأبيض والمن من أضرار اقتصادية للمحاصيل الزراعية حيث تقوم بامتصاص عصارة النبات مما يسبب ضعف النبات. علاوة على ذلك تقوم هذه الآفات بنقل الفيروسات التي تسبب أمراض للنباتات وكذلك تفرز هذه الآفات مادة لزجة يطلق عليها الندوة العسلية التى تقوم بسد الثغور التنفسية فى أوراق النبات وكذلك تنمو عليها الفطريات والبكتيريا الممرضة للنباتات.
ونظرا لما تحدثه المبيدات من تلوث للبيئة وأضرار للإنسان والحيوان فكان الاتجاه السائد فى الآونة الأخيرة هو التركيز على استخدام المكافحة الحيوية للحد من انتشار الآفات الحشرية. وتعتبر الفطريات أحد عوامل المكافحة الحيوية حيث تتميز الفطريات بسرعة النمو وكذلك سهولة تنميتها على البيئات الصناعية وتعتبر وسيلة آمنة على الإنسان و الحيوان.
وتهدف هذه الدراسة إلى استخدام الفطريات كأحد العوامل الحيوية لمكافحة حشرتى الذبابة البيضاء والمن كأحد الآفات الحشرية الثاقبة الماصة. وقد خلصت الدراسة إلى نتائج واعدة والتى يمكن أن تتلخص فى الأتي:
أولا: حصر وعزل للفطريات الممرضة للحشرات:
تم حصر وعزل للفطريات المصاحبة لكل من الذبابة البيضاء والمن وذلك من مدن المنصورة، دكرنس و منية النصر التابعة لمحافظة الدقهلية خلال الفترة من يوليو 2001 الى يونيو 2003 كموسمين متتاليين وذلك بجمع العينات الحشرية من الحقل ثم نقلها الى المعمل وعزل الفطريات المصاحبة لها على بيئة آجار البطاطس (PDA) وكانت نتائج الحصر كما يلى :
1- الفطريات المعزولة من حشرة الذبابة البيضاء:
1-1-الموسم الأول (من يوليو2001 إلى يونيو2002):
تم تجميع عينات الذبابة البيضاء من العوائل النباتية لهذه الحشرة مثل الباذنجان، الخروع، فول الصويا، الكرنب، القرنبيط، الكوسة و البطاطس. ثم نقلت العينات الى المعمل لعزل الفطريات المصاحبة لها. وجد سبعة فطريات مختلفة تصيب هذه الحشرة فى الحقل وتم تسجيلها F1، F2، F3، F4، F5، F6 و F7 . وكانت نسب إصابة الحشرات الكلية خلال الموسم بواسطة هذه الفطريات هى 76٪. رتبت هذه الفطريات تنازليا على أساس نسبة إصابتها للذبابة فكان الترتيب كالتالى F1، F5، F4، F3، F6، F2 و F7 وكانت نسب الإصابة بهم تتراوح ما بين 1.7٪ الى 64.3٪.
1-2- الموسم الثانى (يوليو2002 الى يونيو2003):
تم تجميع عينات الذباب الأبيض من الحقل من نفس العوائل النباتية التى تم التجميع منها فى الموسم الأول. تم نقل الحشرات الى المعمل لعزل الفطريات المصاحبة لهذه الحشرة. وجد أن نفس السبع فطريات التى كانت تصيب الذبابة البيضاء فى الموسم الأول هى التى تصيبها فى الموسم الثانى ورمز لها أيضا كالأتى F1، F2، F3، F4، F5، F6 وF7 . وكانت نسبة اصابة الحشرات الكلية خلال الموسم الثانى بواسطة هذه الفطريات هى 83.6٪. وقد رتبت هذه الفطريات تنازليا على أساس نسبة إصابة الذباب الأبيض فى الحقل خلال الموسم فكانت على النحو التالى F1، F4، F3، F5، F7، F2 و F6 وكانت نسبة الاصابة بهم تتراوح ما بين 63.5٪ الى 0.3٪.
2-الفطريات المعزولة من حشرة المن:
2-1-الموسم الأول (من يوليو2001 الى يونيو2002):
تم تجميع عينات المن من الحقل من العوائل النباتية لهذه الحشرة مثل عباد الشمس، المشمش، القطن و الفول البلدى. تم نقل العينات الحشرية الى المعمل لعزل الفطريات المصاحبة لها على بيئة آجار البطاطس (PDA) وقد وجد سبع فطريات مختلفة تصيب حشرة المن فى الحقل وسجلت كالأتى F1، F2، F3، F4، F5، F6 و F7 وكانت نسبة إصابة الحشرات الكلية خلال الموسم هى 69.4٪. وقد رتبت هذه الفطريات على أساس نسبة إصابة الحشرات بهذه الفطريات فى الحقل خلال الموسم وكانت على النحو التالى F1، F4، F5، F7، F6، F3 و F2 وكانت نسب الاصابة بهم تتراوح ما بين 46.5٪ الى 2.1٪.
2-2- الموسم الثانى (يوليو2002 إلى يونيو2003):
تم تجميع عينات المن من الحقل من نفس العوائل النباتية والتى تم الجمع منها فى الموسم الأول. ونقلت العينات إلى المعمل لعزل الفطريات المصاحبة لها على بيئة PDA وقد وجد أن هذه الحشرة أصيبت بسبعة فطريات مختلفة فى الحقل خلال الموسم وتم تسجيلها كالأتى F1، F2، F3، F4، F5، F6 و F7. وكانت نسبة إصابة الحشرات الكلية خلال الموسم هى 73.5٪ وقد تم ترتيب هذه الفطريات تنازليا على أساس نسبة الإصابة لحشرات المن بهذه الفطريات فكان على النحو التالى F1، F4، F2، F5، F3، F6 و F7 حيث كانت نسبة الإصابة بهذه الفطريات تتراوح ما بين 64.3٪ إلى 0.5٪.
ثانيا: تعريف الفطريات المعزولة واختيار أكفأها فى الاختبارات الامراضية للحشرات تحت الدراسة:
1- تعريف الفطريات المعزولة:
تم تعريف الفطريات المعزولة عن طريق زرع هذه الفطريات على بيئة آجار البطاطس (PDA) ثم وصفت الصفات المز رعية للمستعمرات النامية على البيئة ثم تم عمل شرائح من هذه المستعمرات وإجراء الفحص الميكروسكوبى لمعرفة شكل الميسليوم ونظام تفرعه ومعرفة شكل الجراثيم وقياس حجمها. تم تأكيد التعريف بإرسال العزلات إلى معهد أمراض النبات بالدنيمارك. وكانت النتائج كما يلى:
F1: Cladosporium F2: Verticillium F3: Epicoccum F4: Alternaria
F5: Fusarium F6: Penicillium F7: Aspergillus
حيث تتبع الخمس أجناس الأولى صف Deuteromycetes بينما يتبع الجنس السادس والجنس السابع صف Ascomycetes .
2- اختيار أكفأ الفطريات لاستخدامها فى الاختبارات الامراضية للحشرات تحت الدراسة:
لقد تم اختيار الفطريات الممرضة للحشرات على أساس عاملين أساسيين:
الأول هو عدم إحداث مرض بهذه الفطريات لمعظم العوائل النباتية لكلا الحشرتين (الذبابة البيضاء والمن) حيث وجد أن أجناس Cladosporium ، Verticillium Epicoccum لا تصيب معظم العوائل النباتية لكلا الحشرتين وتم تأكيد ذلك عن طريق غمر أوراق أربعة عوائل نباتية لكلا الحشرتين فى معلق الجراثيم لكل فطر من الفطريات الثلاثة بعد فترة تحضين 7 أيام على درجة حرارة 27 درجة مئوية فوجد أن هذه الفطريات لا تصيب هذه النباتات.
العامل الثانى هو قدرة الفطريات الثلاثة على إنتاج إنزيمات الكيتينيز، البروتينيز، الليبيز والسلليوليز. وقد أظهرت السلات رقم 3 و 4 فى كل فطر ايجابية فى إنتاج إنزيم الليبيز بينما لم تنتج باقى السلالات هذا الانزيم وهذا يفيد فى أن هذه السلالات لها القدرة على تحليل الدهون التى توجد فى جسم الحشرة مما يضعفها ويؤدى الى الموت بينما أظهرت كل السلالات أن هذه الفطريات سوف تكون آمنة على العوائل النباتية للحشرات نتيجة سلبيتها تجاه تحليل السلليولوز. أما فى حالة إنزيم الكيتينيز فقد أعطت جميع السلالات نتيجة موجبة إلا أن السلالتين 3 و 4 كانتا أكثر إيجابية فى إنتاج الإنزيم فى الثلاث فطريات المستخدمة وهذا يفيد فى أن هاتين السلالتين لهما القدرة على تحليل الكيتين الموجود فى طبقة الكيوتيل فى جدار جسم الحشرة مما يعرضها إلى الموت . أما فى حالة إنزيمات البروتينيز فقد أظهرت أيضاً كل السلالات إيجابية فى إنتاج إنزيم الكازينيز وإنزيم الجيلاتينيز ولكن كانت كل من السلالة رقم 3 ، 4 هما الأعلى إنتاجاً للإنزيمات فى الفطريات الثلاثة وهذا يفيد فى استخدام هاتين السلالتين فى تحليل بروتين جسم الحشرة مما يؤدى إلى موتها.
وفى نهاية هذا الاختبار تبين أن السلالتين 3 ، 4 هما الأكفأ فى إنتاج الإنزيمات وتم اختيارهما لإجراء اختبارات الامراضية للحشرات تحت الدراسة كانت السلالات المختارة هى CoMW3 ، CoMW4 تتبع جنس Cladosporium و CFMW3 ، CFMW4 وتتبع جنس Verticillium و GbDW3 ، GbDw4 وتتبع جنس Epicoccum .
ثالثاً : اختبارات الامراضية:
1-العوامل المؤثرة على نمو الفطريات:
1-1-تأثير درجة الحرارة .
تم زراعة الفطريات المختارة على بيئة PDA وتحضينها على خمسة درجات حرارة 20 ، 25 ، 30 ، 35 ، 40 م لمدة 5 أيام فكانت أفضل درجة حرارة لنمو Cladosporium هى 20 م وكانت 30 م هى درجة الحرارة المناسبة لفطر Verticillium وكانت 25 م درجة الحرارة الملائمة لنمو لفطر Epicoccum .
1-2-تأثير الإضاءة :
تم زراعة الفطريات المختبرة على بيئة (PDA) وتحضينها تحت ثلاث مستويات من الإضاءة وهى 24 ساعة إضاءة و 24 ساعة إظلام و 16 ساعة إضاءة إلى 8 ساعات إظلام وذلك لمدة 7 أيام. فوجد أن 24 ساعة إضاءة هو أفضل مستوى إضاءة لنمو فطر Cladosporium و Verticillium ولكن كان مستوى 16 ساعة إضاءة إلى 8 ساعات إظلام هو الأفضل لنمو لفطر Epicoccum .
2-اختبار الامراضية لحشرة الذبابة البيضاء :
تم عمل معلق جراثيم لكل سلالة فطرية (CoMW3 ، CoMW4 ، CfMW3 ، CfMW4 ، GbDW3 ، GbDW4) وتم عمل ثلاثة تركيزات لكل سلالة فطرية وكانت هذه التركيزات هى: الأول : 5×10 6 جرثومة/مل و الثانى 5×10 5 جرثومة /مل والثالث 5×10 4 جرثومة /مل . تم معاملة 100 حشرة بواقع 10 حشرات فى الطبق كمكررة واحدة وذلك برشها بمعلق الجراثيم الفطرية وتم التحضين على درجة حرارة 27 5 م لمدة 5 أيام. وكانت النتائج كالتالى :
2-1-الطور الكامل :
وجد أن التركيز الثانى فى كل من CoMW3 ، CoMW4 أحدث أعلى نسبة موت من الحشرة الكاملة بعد 5 أيام تحضين حيث كانت نسبة الإصابة 86.7٪ لكلا السلالتين من فطر Cladosporium . أما فى حالة السلالتين CfMW3 ،التى تنتمى إلى فطر Verticillium فكان التركيز الثانى هو الأعلى تأثيراً حيث سجلت السلالة CfMW4 76.6٪ . أما فى حالة فطر Epicoccum فقد تساوت نسبة الإصابة فى كل من التركيز الأول والثانى من السلالة GbDW3 وأيضاً التركيز الأول من السلالة GbDW4 حيث كانت نسبة الإصابة 70٪ موت من الحشرات الكاملة .
2-2-حوريات الذبابة البيضاء :
بعد مدة التحضين وجد أن التركيز الأول (5×10 6 جرثومة/مل) فى كل من السلالتين التابعتين لجنس Cladosporium وهما (CoMW3 ، CoMW4) هو الأكثر تأثيرا حيث كانت نسبة الموت فى حالة السلالة CoMW3 هى 100٪ وكانت نسبة الموت فى حالة السلالة CoMW4 هى 91.6 ٪. أما فى حالة جنس Verticillium فكان التركيز الأول أيضا هو الأعلى تأثيرا ولكن أقل منه فى حالة فطر Cladosporium حيث كانت نسبة الموت فى حالة السلالة CfMW3 هى 83.4٪ وفى حالة السلالة CfMW4 هى 79٪ موت . وكذلك كان التركيز الأول (5×10 6 جرثومة /مل) هو الأعلى تأثيرا على حوريات الذبابة البيضاء فى حالة فطر Epicoccum مع كلا السلالتين GbDW3 و GbDW4 حيث كانت نسبة الموت هى 54٪ ، 62٪ على التوالى .
مما تقدم يتضح لنا أن التركيز الثانى فى حالة طور الحشرة الكاملة هو الأعلى تأثيراً بينما يحدث التركيز الأول أعلى تأثيرا فى حالة حوريات الذبابة البيضاء .
3-اختبار الامراضية لحشرة المن :
كذلك فى حالة حشرة المن تم عمل معلق جراثيم فطرية لكلا السلالتين من كل جنس فطرى وتم عمل ثلاثة تركيزات من كل سلالة فطرية (5×10 6 – 5×10 5 – 5 × 10 4 جرثومة/مل).
تم معاملة 100 حشرة بالرش بمعلق الجراثيم بواقع عشر حشرات فى كل مكررة وذلك مع كل تركيز من التركيزات المستخدمة وتم الحضين لمدة خمس أيام على درجة حرارة 27 5 م.
بعد مدة التحضين وجد أن التركيز الأول فى حالة فطر Cladosporium مع كلا السلالتين هو الأعلى تأثيرا حيث كانت نسبة الموت مع السلالة CoMW3 هى 57.1٪ وكانت 52.1٪ فى حالة السلالة CoMW4 . بينما كان التركيز الثانى فى حالة السلالة CfMW3 التابعة لجنس Verticillium هو الأعلى تأثيرا حيث كانت نسبة الموت 38.1٪. أما فى حالة السلالةCfMW4 فكان التركيز الأول هو الأعلى تأثيرا بواقع نسبة موت 45.2٪ ولكن فى حالة فطر Epicoccum فقد تساوى تأثير كلا السلالتين على حشرة المن وذلك مع الثلاث تركيزات مع العلم بأن التركيز الأول كان الأعلى تأثيرا مع كلا السلالتين حيث كانت نسبة الموت45.2 ٪.
مما تقدم يتضح لنا أن تأثير الفطريات المستخدمة على حشرة الذبابة البيضاء كان أعلى من تأثيرها على حشرة المن .
4-اختيار بيئة غذائية لإنتاج الجراثيم الفطرية:
من نتائج اختبارات الامراضية مع حشرة الذبابة البيضاء وحشرة المن وجد أن السلالةCoMW3 التابعة لجنس Cladosporium هى الأكثر تأثيرا بأعلى نسبة موت مع كلا الحشرتين . وعند تعريف هذه السلالة وجد أنها Cladosporium uredinicola وبناء على ذلك تم زراعة هذه السلالة على أربع بيئات مختلفة لاختيار أفضلها لإنتاج الجراثيم . وكانت هذه البيئات هى PDA ، CzpkeDoxes ،Nutrient agar ، Rice-brain agar . وجد بعد مدة التحضين خمسة أيام على درجة حرارة 27درجة مئوية أن البيئة الأخيرة هى أفضل بيئة حيث كان قطر النمو 3.1 سم وكانت كمية الجراثيم 3.6×10 7 جرثومة /مل بواقع 112٪ على أساس بيئة PDA كبيئة عامة .
5-اختبار الامراضية لبعض الحشرات الضارة الأخرى وبعض الأعداء الطبيعية لحشرتى الذبابة البيضاء والمن :
تم عمل ثلاث تركيزات من معلق الجراثيم للسلالة Cladosporium uredinicola
وكانت التركيزات هى نفس التركيزات التى تم استخدامها من قبل وتم معاملة 100 حشره بواقع 10 حشرات فى كل مكرره وذلك مع كل تركيز برشها بمعلق الجراثيم ثم التحضين خمسة أيام على درجة حرارة 27 درجة مئوية. وكانت النتائج كما يلى :
5-1-اختبار الامراضية ضد حشرة الجاسد كأحد الحشرات الضارة :
بعد مدة التحضين وجد أن التركيز الأول أعطى أعلى نسبة موت من حشرات الجاسد وكانت 93.3 ٪ يلية التركيز الثانى بنسبة موت 66.7٪ ويأتى فى النهاية تأثير التركيز الثالث بنسب موت 53.3٪ .
5-2- اختبار الامراضية ضد الأعداء الطبيعية:
فى هذا الاختبار تم معاملة مفترس أبو العيد Coccinella undcimpanctata الذى يفترس كل من الذبابة البيضاء والمن و أيضا تم معاملة طفيل Eretmocerus mundus بمعلق جراثيم فطر C. uredinicola باستخدام الثلاثة تركيزات السالفة الذكر تحت نفس ظروف التحضين السابقة. فوجد أن الطفيل لم يتأثر بمعلق الجراثيم مع الثلاث تركيزات المستخدمة وذلك بعد مدة التحضين. أما فى حالة المفترس وجد أن التركيز الثانى والثالث تساوى تأثيرهما على المفترس مع الكنترول حيث كانت نسبة موت 6.7٪ لكلا التركيزين والكنترول أيضا. ولكن أعطى التركيز الأول نسبة موت عالية 23٪ ولذا يوصى بعدم استخدامه عند معاملة الحقول التى يوجد بها مفترس أبو العيد، ويوصى باستخدام التركيز الثانى بسبب أنه أعطى نسبة موت قليلة مع المفترس ونسبة وفيات عالية مع الحشرات الضارة.
لذلك يوصى باستخدام التركيز الثانى للسلالة C. uredinicola فى برنامج المكافحة المتكاملة IPM حيث أنه يعطى أعلى نسبة موت مقارنة بباقى الخمس سلالات الفطرية المستخدمة فى اختبارات الإمراضية. وكذلك فان هذا التركيز من هذه السلالة لا يؤثر على الأعداء الطبيعية للآفات الحشرية.